未转化的细胞可以是目的基因导入受体细胞后未能表达吗?

1、目前,常用的植物细胞培养基种类有哪些?各有什么特点?

1)MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的平衡溶液。

2)B5培养基其主要特点是含有较低的铵,这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3)White培养基其特点是无机盐数量较低,适于生根培养

4)N6培养基其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高。

5)KM8P培养基其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合培养。

2、简要说明MS培养基的基本组成。

MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、硫酸镁(MgSO4?7H2O)和氯化钾(CaCl2,CaCl2?2H2O)五种化合物。

MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁(FeSO4?4H2O)和乙二胺四乙酸二钠(Na2?EDTA)的螯合物,必须单独配成母液。

MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。

MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素

3、配制培养基时,为什么要先配制母液?如何配制母液?

1)配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取,而且还便于低温保藏。2)基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。

4、常用的灭菌方法有哪些,各有哪些优缺点?

1)湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)优点:高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力,能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡,是一种最有效的灭菌方法。缺点:如果是对培养基或液体溶液灭菌,灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关,时间不足达不到灭菌效果,时间过长培养基内的化学物质遭到破坏,影响培养基成分。

3)干热灭菌缺点:干热灭菌存在能源消耗大、浪费时间、安全性差问题

4)紫外线灭菌缺点:由于紫外线穿透物质的能力很弱,所以只适于空气中和物体表面的


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报告基因(reporter:gene)是指其编码产物能够被快速地测定的一类特殊用途的基因,常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官,并可以方便快速检测其表达活性。

可见报告基因实质是起到了判断目的基因是否已经成功地导入到受体细胞并且表达的标记基因的作用。作为理想的植物报告基因应具备以下特征:①编码的产物是惟一的,并且对受体细胞无毒;

②表达产物及产物的类似功能在未转化的细胞内不存在,即无背景;

③产物表达水平稳定,便于检测等。


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报告基因(reporter:gene)是指其编码产物能够被快速地测定的一类特殊用途的基因,常用来判断外源基因是否已经成功地导入受体细胞、组织或器官,并可以方便快速检测其表达活性。

可见报告基因实质是起到了判断目的基因是否已经成功地导入到受体细胞并且表达的标记基因的作用。作为理想的植物报告基因应具备以下特征:
1、编码的产物是惟一的,并且对受体细胞无毒。
2、表达产物及产物的类似功能在未转化的细胞内不存在,即无背景。
3、产物表达水平稳定,便于检测等。

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