作者：张倩炎（福医大药学3班）
第一章 绪论及药典概况
GLP ——《药物非临床研究质量管理标准》 GCP ——《药物临床试验质量管理标准》 GMP ——《药品生产质量管理规范》 GSP ——《药品经营质量管理规范》 GAP ——《中药材生产质量管理规范》
药品=中药+化学药品+生物制品 药典=凡例+索引+正文+附录
遮光：容器不透光 密闭：容器密闭，防止尘土进入 密封：容器密封防止风化、吸潮、挥发 熔封：防止空气和水分进入 阴凉处：不超过20℃ 凉暗处：避光并不超过20℃ 冷出：2~10℃ 常温：10~30℃
精密称定：重量准确至千分之一 称定：重量准确至百分之一 精密量取：符合移液管的精度要求 量取：符合量筒的量取要求 “约”若干：不得超过规定量的10%
7、比旋度的计算 ☆☆☆
[α]为比旋度；D 为钠光谱的D 线；l 为测定管的长度，dm ；α为测得的旋光度；d 为液体的相对密度。
第二章 药物的鉴别试验
性状：外观、溶解度、物理常数（熔点、比旋度、吸光度）
有机氟化物：氧瓶燃烧法，加茜素氟蓝试液，显蓝紫色。
水杨酸盐：加三氯化铁试液，在中性时呈红色，弱酸性时呈紫色。 酒石酸盐：加氨制硝酸银试液，水浴加热，试管壁成银镜。
芳香第一胺：加稀盐酸和碱性β-萘酚试液，生成由橙黄至猩红色沉淀。
托烷生物碱类：加发烟硝酸，水浴蒸干得黄色残渣，放冷加乙醇和氢氧化钠，显深紫色。 金属盐：焰色反应，钠黄钾紫钙砖红。
铵盐：加过量氢氧化钠，加热分解产生氨气，遇润水的红色石蕊试纸变蓝。
氯化物：滴加硝酸银试液，生成白色沉淀，加氨试液即溶解，再加稀硝酸酸化，沉淀又生成。 硫酸盐：加氯化钡试液，生成白色沉淀。
硝酸盐：加等量的硫酸混合，冷却后加硫酸亚铁试液，溶液分层，界面层显棕色。
呈色反应、沉淀反应、荧光反应、气体生成反应、试剂褪色鉴别、测定生成物的熔点等等。
紫外光谱：采用两种浓度的供试液分别测定其最大吸收波长。
红外光谱：适用于组分单一，结构明确的原料药，ChP 采用标准图谱对照法，USP 采用对照品法。 原子吸收光谱：适用于金属元素。
核磁共振：用于各种分子物理和化学结构的研究。 质谱：广泛应用于药物的定性鉴别和定量测定。
薄层色谱TLC 鉴别法、高效液相色谱和气相色谱HPLC-MC 鉴别法。
显微鉴别、生物学法、指纹图谱法。
第三章 药物的杂质检查
生产过程：原料或辅料不纯、反应中间体、副产物；
贮藏过程：在外界条件影响下发生水解、氧化、分解、异构、聚合、潮解、发霉等。
一般杂质：自然界分布广泛，在药物生产贮藏过程中易引入的杂质。 特殊杂质：特定药物生产贮藏过程中引入的杂质，也称有关物质。 杂质限量L 的计算 ☆☆☆ （见P 100）
C 为杂质标准液的浓度；V 为体积；S 为供试品杂质最大允许量。
化学方法：显色法、沉淀法、生成气体法、滴定法。
色谱方法：薄层色谱法（杂质对照品法、供试液自身稀释对照法、两者并用、对照药物法） 高效液相色谱法（外标法或对照品法、自身对照法、面积归一化法） 气相色谱法（标准溶液加入法）、毛细管电泳法 光谱方法：紫外分光光度法、红外分光光度法
其他方法：热分析法、酸碱度检查法、物理性状检查法
氯化物：在酸性条件下与硝酸银反应，生成白色沉淀。
（注：加硝酸可避免弱酸银盐沉淀的干扰；供试品液如带颜色，可采用内消色法解决。） 硫酸盐：在酸性条件下与氯化钡反应，生成白色沉淀。
铁盐：在酸性溶液中与硫氰酸盐作用生成红色可溶性配合物。
（注：加过硫酸铵的目的是使Fe 转换成Fe ，酸性条件下反应可以防止Fe 的水解。）
重金属盐：硫代乙酰胺在酸性条件下水解产生硫化氢，与重金属离子生成黄色到棕黑色的混悬液。或者在碱性溶液中以硫化钠为显色剂，与铅溶液生成硫化铅沉淀（如磺胺类、巴比妥类药物）。 （注：该比色法用到3支比色管，分别为对照管、供试管、监控管。）
砷盐：采用古蔡法或二乙基二硫代氨基甲酸银法检查。金属锌与酸作用生成氢气，与药物中的砷离子生成易挥发的砷化氢，遇溴化汞试纸，产生黄色至棕色的深斑。后者的方法可产生红色胶态银。
制锑化氢的生成； c.醋酸铅棉花的作用是吸收H 2S 气体，起到过滤的作用。 （注：Sb
作用：主要检查水分及其他挥发性物质。
方法：常压恒温干燥法、减压干燥法与恒温减压干燥法、干燥剂干燥法。
方法：费休氏法（原理：碘氧化二氧化硫时消耗水）、甲苯法。
作用：检测有机药物经碳化后无机盐和金属氧化物。
方法：目视比色法。（加入硫酸使之呈色。）
按有机溶剂毒性的程度分为四类：
第一类（避免使用）：苯、CCl 4等 第二类（限制使用）：CHCl 3、环己烷等 第三类（控制使用）：乙醇、乙醚、乙酸乙酯等 第四类（无限制）：三氯乙酸、石油醚等 方法：GC 法。（毛细管柱顶空进样等温法/程序升温法、溶液直接进样法）
10、溶液澄清度检查法
*扩展 酸碱滴定法、沉淀滴定法、吸附法
第四章 药物的含量测定方法与验证
方法要求：操作简便、结果准确、重现性好。
验证内容：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、耐用性等。
分类：容量分析法（滴定法）、光谱分析法、色谱分析法。 1）容量分析法
特点：简便易行、耐用性高、结果准确、专属性差。
分类：直接滴定法、间接滴定法（生成物滴定法和剩余量滴定法）。 滴定度的计算 ☆☆☆ （见P 145） T 为滴定度，mg/ml；m 为滴定液的摩尔浓度；a/b为被测药物/滴定剂的摩尔数；M 为被测药物的摩尔质量。
含量的计算 ☆☆☆ （见P 146）
V 为滴定体积；T 为滴定度；F 为校正因子；W 为供试品的称取量。 2）光谱分析法
朗伯比尔定律：A=Ecl （E 为百分吸收系数，即每100ml 待测药物的吸光度值，c 的单位g/100ml） 测定方法：对照品比较法、吸收系数法、分光光度法、比色法。 标示量的计算 ☆☆☆ （见P 149）
C x 为供试品溶液的浓度；D 为稀释体积；W 为平均片重/装量；W 为供试品取样量；B 为标示量。 3）色谱分析法
测定法：外标法（标准曲线法）、内标法（标准加入法）。
系统适用性实验指标：理论塔板数、分离度、重复性、拖尾因子。 气相色谱测定：外标法、内标法、标准溶液加入法。
酸水解法：用于水难溶的含金属有机药物。 碱水解法：用于含卤素的有机药物。 还原法：用于含碘的有机药物。
凯氏定氮法：将含N 药物与硫酸在凯氏烧瓶中共热，药物结构被氧化分解成CO 2和H 2O ，有机N 变为无机氨，并于过量的硫酸结合，经氢氧化钠碱化后释放出NH 3，经硼酸溶液吸收后，用酸碱滴定。
第六章 芳酸类非甾体抗炎药物的分析
用途：抑制前列腺素合成，抗炎抗风湿、止痛退热和抗凝血等作用。 结构特征：苯环、游离羧基。
典型药物：阿司匹林、双水杨酯、甲芬那酸、布洛芬、萘普生、吲哚美辛、吡罗昔康、扑热息痛。 2、鉴别实验
水杨酸反应：水杨酸加三氯化铁试液，生成紫堇色配位化合物。 酚羟基反应：对乙酰氨基酚的水溶液加三氯化铁试液，显蓝紫色。 2）缩合反应
酮洛芬（二苯甲酮）：酸性条件下与二硝基苯肼缩合，生成橙色偶氮化合物。 3）重氮化-偶合反应
芳伯氨基：在稀盐酸加热条件下，与亚硝酸钠试液反应，再与碱性β-萘酚偶合生成红色偶氮化合物。 4）氧化反应
甲芬那酸：溶于硫酸后，与重铬酸钾反应显深蓝色，随即变为棕绿色。
吲哚美辛：在硫酸存在下，与重铬酸钾共热，应显紫色；在盐酸中与亚硝酸钠反应显绿色，渐变黄色。 5）水解反应
阿司匹林与Na 2CO 3试液加热水解后，加过量稀硫酸酸化，生成白色沉淀，并产生醋酸臭气。 6）光谱法（略）、7）色谱法（略）。
1）阿司匹林中游离水杨酸的检查
检测方法：稀硫酸铁铵溶液显色反应。
注：药典采用1%冰醋酸溶液制备供试品溶液，以防阿司匹林水解，同时采用HPLC 检查，C 18作填充剂。 有关物质：除游离水杨酸外的合成原料（苯酚）及其他合成副产物，如醋酸苯酯、水杨酸苯酯、水杨酸苷、水杨酰水杨酸、乙酰水杨酸苯酯等。
注：除水杨酸峰外，其他各杂质峰面积的和不得大于对照溶液主峰面积。
a. 直接滴定法：药物溶于中性乙醇，以酚酞为指示剂，用NaOH 滴定液直接滴定。
b. 剩余量滴定法：用定量过量的NaOH 滴定液溶解后，用盐酸滴定液回滴定剩余的NaOH 滴定液。
c. 水解后剩余量滴定法：加入定量过量的NaOH ，加热使酯键水解后，再用硫酸回滴剩余的NaOH 滴定。 d. 两步滴定法：第一步中和制剂中酸性水解产物及稳定剂，以消除干扰；第二步为水解后剩余量滴定。 （注：阿司匹林原料药采用酸碱滴定法，而阿司匹林片剂采用两步滴定法。）
e. 非水溶液滴定法：吡罗昔康具有吡啶环，显碱性，可在冰醋酸溶液中用高氯酸滴定液滴定。
第七章 苯乙胺类拟肾上腺素药物的分析
用途：收缩血管、升血压、散瞳、舒张支气管、迟缓胃肠肌、加速心率、加强心肌收缩等作用。 结构：邻苯二酚、苯乙胺（3个取代基团）。
典型药物：肾上腺素、异丙R 、重酒石酸去甲R 、盐酸去氧R 、盐酸多巴胺、盐酸甲氧明、麻黄碱等。 ）、旋光性、紫外吸收特性。
a. 三氯化铁反应：酚羟基与Fe3+配位显绿色；在碱性条件为紫红色。
b. 甲醛-硫酸反应：肾上腺素显红色，异丙显暗紫色，重酒石酸显淡红色。 c. 还原反应：略。
d. 氨基醇的双缩脲反应：（鉴别盐酸麻黄碱）加CuSO 4与NaOH 即显蓝紫色；加乙醚后分层，乙醚层显紫红色，水层显蓝色。
项目：酮体杂质（紫外分光法）、光学纯度ee （色谱法和电泳法）、有关物质（TLC ——盐酸去氧肾素；纸色谱——盐酸苯乙酸胍；HPLC ——其他药物）。
对象：有机碱及其氢卤酸盐、磷酸盐、硫酸盐及金属盐类药物。
非水溶剂种类：酸性R 如冰醋酸；碱性R 如二甲基甲酰胺；两性R 如甲醇；惰性R 如甲苯、三氯甲烷。 基本原理：强酸置换出与弱碱结合的弱酸，即BH +A - + HClO4 → BH +ClO4- + HA。 （注：有机弱碱的盐均用高氯酸滴定。）
（注：加入定量的醋酸汞-冰醋酸溶液的目的是消除氢卤酸对滴定的干扰。）
终点指示：常用电位法和指示剂法。指示剂为结晶紫，酸式色为黄色，碱式色为紫色。 2）溴量法
对象：盐酸去氧肾素、重酒石酸间羟胺原料药《药典ChP2010》
原理：苯酚结构在酸性条件下与溴定量发生反应，再以碘量法滴定剩余的溴。 3）亚硝酸钠法
方法：芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠定量发生重氮化反应，用永停法指示终点。 4）紫外分光法与比色法（略） 5）高效液相色谱法（略）
第八章 对氨基苯甲酸酯和酰苯胺类局麻药的分析
用途：局部可逆性地阻断神经冲动发生与传导。
结构：亲脂性芳香环、中间连接功能基（酯键-对氨基R ；酰胺键-酰苯胺R ）、亲水性胺基。
典型药物：对氨基类（苯佐卡因、普鲁卡因、丁卡因）、酰苯胺类（利多卡因、布比卡因、罗哌卡因）。 理化性质：芳伯氨基特性、水解特性（酯键）、弱碱性（叔胺氮）、与重金属反应特性、吸收光谱特性。
原理：芳伯氨基在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，加入减小β-萘酚溶液显猩红色沉淀。芳仲胺在酸性溶液中与亚硝酸钠反应，生成乳白色沉淀。 2）与金属离子反应
a. 鉴别盐酸利多卡因：在Na 2CO 3试液中与CuSO 4反应生成蓝紫色配位化合物。再溶入CHCl 3中显黄色。 b. 鉴别盐酸普鲁卡因胺：被浓H 2O 2氧化成羟肟酸，再与FeCl 3反应显紫红色，随即变为棕黑色。 3）水解产物反应
a. 鉴别苯佐卡因：加NaOH 试液煮沸，再加入碘加热，生成黄色沉淀，并产生碘仿的臭气。
b. 鉴别盐酸普鲁卡因：加NaOH 溶液即生成白色沉淀，加热变为油状物，继续加热，产生的蒸汽能使红色石蕊试纸变蓝，热至油状物消失后，加盐酸即析出白色沉淀。
项目：盐酸普鲁卡因中对氨基苯甲酸的检查（HPLC ，C 18为填充剂，反向）； 盐酸普鲁卡因中有关物质和光解产物的检查（LC/MS联用）； 盐酸利多卡因中2，6-二甲基苯胺的检查（HPLC ）； 盐酸罗哌卡因的光学纯度检查（毛细管电泳）。
原理：重氮化反应，用永停法指示终点。
注：重氮化反应的速度与温度成正比，但是生成的重氮盐又随温度升高而分解。 2）非水溶液滴定法
方法：将供试品溶于冰醋酸-醋酐溶液中，用高氯酸滴定至终点；以电位法指示滴定终点。 注：加入醋酐的目的是增强布比卡因的碱性，使滴定突跃明显。 3）紫外分光光度法（外标一点法） 4）高效液相色谱法（略）
第九章 二氢吡啶类钙通道阻滞药物的分析
用途：钙通道阻滞药，用于缺血性心血管疾病、高血压、脑血管疾病的治疗。 结构：苯基、1，4-二氢吡啶母核。
典型药物：硝苯地平、尼莫地平、氨氯地平、尼索地平、非洛地平等。
理化性质：还原性（吡啶环）、氧化性（硝基）、解离性、稳定性（光化作用）、旋光性、光谱特性。
a. 亚铁盐反应：苯环硝基具有氧化性，可与Fe(OH)2发生氧化反应，生成红棕色沉淀。 b. NaOH 试液反应：药物在丙酮溶液中与NaOH 试液反应，显橙红色。
c. 沉淀反应：二氢吡啶可与重金属盐类形成沉淀。（如尼莫地平与HgCl 生成白色沉淀） d. 重氮化-偶合反应：苯环硝基在酸性条件下被锌粉还原为芳伯氨基，可鉴别。 e. 紫外分光法、红外分光法、色谱法。（略）
方法：HPLC 法。（避光操作）
a. 铈量法：在强酸条件下进行滴定，Ce 4+自身可作指示剂。（4价为黄色，3价为无色） b. 紫外分光法、高效液相色谱法。（略）
第十章 巴比妥及苯二氮杂卓类药物的分析
第一节 苯巴比妥类药物的分析 1、性质
用途：广泛用于镇静催眠。
结构：环状丙二酰脲（母核）、1，3-二酰亚胺（母核基团）。
典型药物：巴比妥、苯巴比妥、司可巴比妥、戊巴比妥、异戊巴比妥、硫喷妥钠等。
*扩展 理化性质 [ 口诀：银白铜钴紫硫蓝 ]
a. 弱酸性：二酰亚胺上氢受邻位羟基影响，发生质子转移（发生二级电离）； b. 水解性：酰亚胺结构与碱液共沸，水解释放出NH 3，可使红色石蕊试纸变蓝。 （注：可用于鉴别异戊巴比妥和巴比妥） c . 与金属离子反应（含丙二酰脲）：
银盐（在Na 2CO 3溶液中生成钠盐而溶解，再与硝酸银反应，先生成一银盐，硝酸银过量时生成二银盐。一银盐可溶解，二银盐不溶。）
铜盐（在吡啶溶液中生成烯醇式异构体，再与铜-吡啶试液反应，生成紫色配合物。鉴别含S 巴比妥类药物：与铜盐反应显绿色）
钴盐（碱性溶液中与钴盐反应，生成紫堇色配合物）
汞盐（与硝酸汞或氯化汞反应，生成白色沉淀，沉淀能在氨试液中溶解） d. 香草醛反应：在浓硫酸存在下与香草醛发生缩合反应，生成棕红色产物。
e. 显微结晶：在显微镜下观察，巴比妥为长方形结晶，苯巴比妥开始结晶时球形，后为花瓣状。
a. 银盐反应：与碳酸钠、硝酸银反应，生成白色沉淀，沉淀振摇即溶解，硝酸银过量时沉淀不溶解。 b. 铜盐反应：在吡啶溶液中溶解后，与铜吡啶试液反应，显紫色。（或生成紫色沉淀） 2）特征基团反应
a. 硫元素：在NaOH 溶液中与Pb 离子反应，生成白色沉淀。
b. 不饱和取代基：分子结构含有丙烯基，可与I 2、Br 2或KMnO 4作用，发生加成反应，使其褪色。 （注：可用于司可巴比妥的专属鉴别）
硝化反应（与KNO 3及H 2SO 4共热，生成黄色硝基化物）
亚硝酸钠反应（苯巴比妥与硫酸-亚硝酸钠反应，生成橙黄色产物，ChP 用于鉴别苯巴比妥和苯巴比妥片）
甲醛-硫酸反应（苯巴比妥与甲醛-硫酸反应，生成玫瑰红色产物，用于鉴别巴比妥和无芳环取代的巴比妥类药物）
硫代巴比妥——铅离子沉淀； 司可巴比妥——高锰酸钾褪色； 苯巴比妥——硝化反应，显黄色；甲醛-硫酸反应，玫瑰红。
项目：酸度（甲基橙指示剂）、乙醇溶液的澄清度、中性或碱性物质（提取重量法）、有关物质。
方法：银量法、溴量法、紫外分光法、酸碱滴定法、提取重量法、HPLC 法、GC 法及电泳法。 a. 银量法：ChP 采用甲醇和3%无水Na 2CO 3溶剂系统，以银-玻璃电极电位法指示终点。 b. 溴量法：用于司可巴比妥原料药及其胶囊的测定。（滴定比例1：1）
c. 酸碱滴定法：包括水-乙醇混合溶剂滴定、胶束水溶液滴定、非水溶液滴定（指示剂为麝香草酚蓝）。 d. 其他方法（略）
第二节 苯并二氮杂卓类药物的分析 1、性质
用途：用于抗焦虑、抗惊厥。 结构：苯环、七元含氮杂环。
典型药物：地西泮、氟硝西泮、氯氮卓、三唑仑、奥沙西泮、劳拉西泮等。
（注：地西泮水解生成芳仲胺基和甘氨酸，可用于专属鉴别。）
a. 生物碱沉淀反应：遇碘化铋钾试液显橙红色沉淀。
d. 芳伯胺的反应：重氮化-偶合反应。（或亚硝酸钠反应） e. 其他：略。
方法：GC 法或HPLC 法。（注：三唑仑采用HPLC 法1%溶液主成份自身对照法检查。）
1）非水溶液滴定法（原料药的测定）
a. 非水碱量法：pKa 为8~10时，冰醋酸溶剂；pKa 为10~12时，冰醋酸与醋酐混合溶剂；pKa 〉12时，醋酐溶剂。
b. 非水酸量法：采用氢氧化四丁基铵为滴定液，以电位法指示终点。 2）紫外分光法
a. 对照品比较法 b. 吸收系数法
（注：本类药物中，原料药仅奥沙西泮采用此法测定。）
第十一章 吩噻嗪类抗精神病药物的分析
用途：阻断多巴胺受体，治疗Ⅰ型精神分裂症（控制幻觉和妄想）。 结构：硫氮杂蒽（母核）、2位和10位取代基。
典型药物：盐酸氯丙嗪、盐酸异丙嗪、奋乃静、氟奋乃静、盐酸氟奋乃静等。
a. 生物碱沉淀反应：与三硝基苯酚反应，生成沉淀。
b. 氧化显色反应：盐酸异丙嗪——与硝酸反应生成红色沉淀，加热即溶解，溶液变为橙黄色。 盐酸氯丙嗪——加硝酸显红→黄，加FeCl 3显红色。 c. 与钯离子配位反应：葵氟奋乃静与氯化钯反应，生成红色沉淀。 d. 卤素取代基的焰色反应：奋乃静在铜网上加热，火焰显绿色。 e. 红外分光法：吩噻嗪类原料药均用红外分光法鉴别。 f. 色谱法：GC 法、HPLC 法。（略）
（注：鉴别a 盐酸氯丙嗪、b 氟奋乃静与c 奋乃静：a 含Cl ，b 含F ，加入氢氧化钠后a 溶c 不溶。） （鉴别盐酸氯丙嗪和盐酸异丙嗪：加硫酸，显樱桃红色的为异丙嗪；加硝酸有红色沉淀的是异丙嗪。）
氯丙嗪：HPLC 法。（辛基硅烷键合硅胶为填充剂，乙腈-三氟乙酸为流动相。） 奋乃静：HPLC 法。（C18键合硅胶为填充剂，甲醇为流动相。）
方法：酸碱滴定法、分光法、HPLC 法、LC-MS 联用法。（奋乃静：原料药用非水法，片剂用紫外法。） a. 非水溶液滴定法：冰醋酸-醋酐为溶剂，高氯酸溶液滴定。（加入醋酸汞可使反应进行完全。） b. 提取后分光法：用分光法测定时，通过提取以排除辅料的干扰。 c. 钯离子比色法：略。
d.HPLC 法：采用反向RP-HPLC 法和离子对色谱法分离，紫外检测器检测。
第十二章 喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析
第一节 喹啉类药物的分析 1、性质
用途：抗疟药。 结构：喹啉。
典型药物：硫酸奎宁、磷酸哌奎、磷酸氯喹、磷酸伯氨喹等。
（注：磷酸哌奎和磷酸咯奈啶无手性碳，故无旋光性。）
根据用药目的将抗疟药分为3类：用于控制症状——磷酸氯喹，硫酸奎宁、青蒿素等； 用于控制复发和传播——磷酸伯氨喹； 用于病因学预防——乙胺嘧啶、磺胺类
a. 绿奎宁反应：奎宁经氯水氧化，氨水处理缩合，生成绿色的铵盐。
b. 硫酸盐的鉴别反应：BaCl2生成白色沉淀；加醋酸铅生成白色沉淀，沉淀在氨试液中溶解。 c. 氯化物的鉴别反应：AgNO3生成白色沉淀；加MnO2加热产生Cl2，使淀粉试纸变蓝。
d. 磷酸盐的鉴别反应：加AgNO3生成黄色沉淀；加氯化铵镁生成白色沉淀；加钼酸铵与硝酸生成黄色沉淀。 e. 荧光反应：硫酸奎宁和二盐酸奎宁在稀硫酸溶液中均显蓝色荧光。
a. 硫酸奎宁的纯度检查：酸度、三氯甲烷-乙醇中不溶物质、其他金鸡纳碱。 b. 磷酸咯奈啶的纯度检查：酸度、水中不溶物、氯化物、甲醛、四氢吡咯。
1）硫酸奎宁的含量测定
硫酸奎宁：非水溶液滴定法。1mol 硫酸奎宁消耗3mol 高氯酸滴定液。（加入冰醋酸，发生一级电离） 硫酸奎宁片：非水溶液滴定法。1mol 硫酸奎宁消耗4mol 高氯酸滴定液。（未加冰醋酸，发生二级电离）
第二节 青蒿素类药物的分析 1、性质
结构：倍半萜内酯、过氧桥。
典型药物：青蒿素、青蒿琥酯、蒿甲醚等。
理化性质：氧化性、旋光性（右旋）、水解性（内酯）、紫外特性。
a. 过氧桥的氧化反应：酸性条件下与KI 试液反应，淀粉指示液显蓝紫色。
b. 羟肟酸铁反应：在碱性条件下与羟胺作用生成羟肟酸，在烯酸中与高铁离子呈紫红色。 c. 香草醛-硫酸反应：加入香草醛-硫酸试剂，显红色。
项目：有关物质（衍生物、结构类似物）。
方法：青蒿素类原料药采用HPLC 法测定，双氢青蒿素采用水解后UV 法。
第十三章 莨菪烷类抗胆碱药物的分析
用途：生物碱类抗胆碱药。 结构：含氧桥环、苯环取代基。
典型药物：硫酸阿托品、氢溴酸后阿托品、硫酸莨菪碱、山莨菪碱、东莨菪碱等
（注：阿托品类药无旋光性，而东莨菪碱有旋光性，可用于鉴别。）
a. 托烷生物碱Vitali 反应：酯键水解后，经发烟硝酸加热，再与KOH 醇溶液和固体KOH 作用，显深紫色。 b. 硫酸-重铬酸钾反应：本类药物水解后，与硫酸-重铬酸钾加热反应，产生苦杏仁臭味。 c. 生物碱显色/沉淀反应：常用沉淀剂如碘化铋钾、三硝基苯酚、磷钨酸等。 d. 光谱法、色谱法。（略）
e. 硫酸盐和溴化物的反应：莨菪烷类药物制品水溶液大多为硫酸盐和氢溴酸盐，因此鉴别。
项目：酸度（pH4.0~5.5）、易氧化物、其他生物碱。
基本原理：在适当pH 水溶液中，碱性药物与H+结合成阳离子，而一些酸性染料可解离成阴离子；两种
离子定量地结合，生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对。
酸性染料：溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等。
影响因素：水相的pH 、酸性染料的种类及浓度、有机溶剂的选择、有机相的水分、酸性染料中有色杂质。
注：硫酸阿托品与高氯酸反应的化学计量比为1：1。（硫酸在冰醋酸中发生一级解离）
注：醋酸汞作用：消除氢氯酸盐的干扰。
分析碱性物质——阴离子对试剂——戊烷/庚烷/十二烷磺酸钠。
分离酸性物质——阳离子对试剂——四丁基溴化铵、四丁基氢氧化铵。
常用扫尾剂：醋酸铵、三乙胺、二乙胺等。
第十四章 维生素类药物的分析
第一节 维生素A 的分析
结构：环己烯、共轭多烯醇侧链。
自然来源：海鱼肝脏提取的脂肪油，通称鱼肝油。
（注：维生素A 1又称视黄醇；鱼肝油中维生素A 主要为醋酸酯和棕榈酸酯。）
（维生素按溶解度分为脂溶性——A 、D 、E 、K 等；和水溶性——B 、C 、烟酸、叶酸等。）
a. 三氯化锑反应：维生素A 在无水三氯化锑的无醇三氯甲烷溶液中显蓝色，渐变为紫红色。
（注：反应必须在无水、无醇条件下进行。）
b. 紫外分光法、薄层色谱法。（略）
1）紫外分光法（三点校正法）
方法：三点校正法。（目的：消除无关吸收的干扰）
原理：a. 杂质的无关吸收在310~340nm处几乎呈一条直线。
b. 物质对光的吸收具有加和性。
测定法：直接滴定法（测定维A 醋酸酯）、皂化法（测定维A 醇）。
维生素A 醋酸酯的计算 ☆☆☆
A 为A 328或A 校正；D 为稀释倍数；1900为换算因子；W 为内容物称量；B 为标示量。
（注：若吸光度差值超过0.02时，计算A 校正，若A 校正与A 的差值在-15%~3%时，用A 校正计算。）
条件：硅胶为填充剂，正己烷-异丙醇为流动相，检测波长为325nm 。
3）三氯化锑比色法（略）
第二节 维生素B 1的分析
结构：氨基嘧啶环、噻唑环。（含S 含N ）
自然来源：广泛存在于米糠、麦麸、酵母中。
a. 硫色素荧光反应：在碱性溶液中，被铁氰化钾氧化，与正丁醇中显蓝色荧光。
b. 沉淀反应：嘧啶环和氨基具有生物碱的特征，可与生物碱沉淀剂反应。[碘红汞钾黄钨白]
c. 氯化物鉴别反应：略。
d. 硫元素反应：与NaOH 共热，再与硝酸铅反应生成黑色沉淀。
a. 非水滴定法：1mol 维生素B 1消耗2mol 高氯酸滴定液。（维生素B 1具有2个碱性基团）
b. 紫外分光法。（略）
c. 硫色素荧光法。（略）
第三节 维生素C 的分析
结构：烯二醇、内酯环。
a. 与硝酸银反应：烯二醇具有强还原性，可被硝酸银氧化，产生黑色金属银沉淀。
b. 与二氯靛粉钠反应：2，6-二氯靛粉钠在酸性介质中为玫瑰红色，碱性介质中为蓝色。与维生素C 作用后生成还原型无色的酚亚胺。
c. 与其他氧化剂反应：氧化剂如亚甲蓝、高锰酸钾、碱性酒石酸铜、磷钼酸等。
d. 薄层色谱法：略。
e. 糖类的反应：维C 可在三氯醋酸存在下转化为糠醛，加入吡咯，加热至50℃呈现蓝色。
项目：溶液的澄清度与颜色检查、铁/铜离子的检查（原子吸收光度法）、草酸的检查（比浊法）。
a. 碘量法：略。（丙酮的目的：消除抗氧剂/掩蔽剂的干扰。）
b. 二氯靛粉滴定法：略。
c. 高效液相色谱法：固定相为C18键合硅胶，流动相为甲醇-偏磷酸溶液。
第四节 维生素D 的分析
结构：开环麦角甾醇。 2、鉴别试验
a. 醋酐-浓硫酸反应（红-紫-蓝-绿） b. 三氯化锑反应（粉红色） c. 三氯化铁反应（橙黄色）
b. 薄层色谱法、HPLC 法：鉴别维生素D2和D3。
注：ChP 规定，维生素D2检查麦角甾醇，而维生素D3未要求。
方法：正相高效液相色谱。
第五节 维生素E 的分析
结构：苯并二氢吡喃醇衍生物、苯环、酚羟基。
（注：维生素E 的天然品为右旋体，合成品为消旋体。）
a. 硝酸反应：在硝酸酸性条件下水解成生育酚，继续被硝酸氧化，显橙红色。
b. 三氯化铁反应：在碱性条件下水解成生育酚，被Fe3+氧化后，与联吡啶反应，显红色。
c. 紫外分光法、薄层色谱法：略。
项目：酸度、生育酚（硫酸铈滴定法，二苯胺试剂，亮黄色）、有关物质、残留溶剂（气相色谱法）。 （注：维生素E 中生育酚的检查是唯一用滴定法检查杂质的有机物。）
方法：GC 法（采用正三十二烷内标法，固定液为硅酮）
HPLC 法（固定相为C18，流动相为甲醇-水。）
第十五章 甾体激素类药物的分析
结构：环戊烷并多氢菲。
药理分类：肾上腺皮质激素、性激素（雄激素、雌激素、孕激素）。
骨架分类：雄甾烷、雌甾烷、孕甾烷。（根据C10、C13、C17位取代基的不同分类）
结构特征：肾上腺皮质激素——A 环有Δ4-3-铜基，有紫外吸收；C17位有α-醇酮基，具有还原性。 雄激素——A 环有Δ4-3-铜基；C17位有羟基。
孕激素——A 环有Δ4-3-铜基；C17位有甲酮基、羟基。
雌激素——A 环为苯环，C3位有酚羟基；C17位偶羟基、乙炔基。
a. 硫酸显色反应：氢化可的松在硫酸作用下，显棕黄色并有绿色荧光，加水稀释后显黄色，有絮状沉淀。 b. C17-甲酮基反应：黄体酮与亚硝基铁氰化钠反应，生成蓝紫色产物。
c. C17-α-醇酮基反应：加碱性酒石酸显砖红色沉淀；加氯化三苯四氮唑显红色；加氨制硝酸银显黑色沉淀。 d. 炔基的沉淀反应：与硝酸银反应，生成白色的沉淀。
e. 紫外分光法：含Δ4-3-铜基的药物在240nm 处有最大紫外吸收。
A 环具有酚羟基的雌激素在280nm 处有最大吸收。
f. 红外分光法、色谱法：略。
项目：有关物质（甾体类似物，色谱法）、硒的检查（氧瓶燃烧法）、残留溶剂（GC 法）、游离磷酸盐（磷钼酸比色法）。
a.HPLC 法：C18为填充剂，三乙胺-甲醇-乙腈为流动相，检测波长为242nm 。
b. 四氮唑比色法：皮质激素（C17位醇酮基）在强碱溶液中将四氮唑盐还原成有色甲簪。
c. 异烟肼比色法：甾体激素（C3酮基）在酸性条件下与羰基试剂（异烟肼）反应，生成黄色产物。 d. Kober 反应：雌激素与硫酸-乙醇反应，显红色，并在520nm 附近有最大吸收。
第十六章 抗生素类药物的分析
项目包括：结晶性、溶液澄清度、酸碱度、毒性、热源、内毒素等。
测定方法：微生物检定法（管碟法、浊度法）、HPLC 法。
第二节 β-内酰胺类抗生素
结构：β-内酰胺环、6-氨基青霉烷酸。（母核，简称6-APA ）
典型药物：青霉素类——阿莫西林、青霉素钠、氨苄西林、普鲁卡因青霉素等。
头孢菌素类——头孢他啶、头孢克洛、头孢拉定、头孢氨苄等。
（注：青霉素的碱金属盐水溶液遇酸析出白色沉淀。）
（注：头孢菌素类有紫外特性，而青霉素类只有侧链含苯环时才有紫外特性。）
*扩展 青霉素的降解反应
降解： H2O ，OH-或青霉素酶 → 青霉噻唑酸 NH2OH → 异羟肟酸
b. 异羟肟酸铁反应：在碱性中与羟胺反应生成羟肟酸，在烯酸中与Fe3+反应，呈紫红色。
c. 双缩脲/茚三酮反应：本类药物含α-氨基酸结构，反应显蓝紫色，可用于鉴别。
d. 重氮苯磺酸反应：本类药物含酚羟基，可用此鉴别。
e. 硫酸呈色反应：头孢氨苄/黄色、头孢噻肟钠/亮黄色、头孢噻吩钠/红棕色。
项目：高分子聚合物（分子排阻法）、有关物质（TLC 法）、异构体、吸光度、有机溶剂、结晶性。
方法：微生物检定法、HPLC 法
（注：除氨苄西林钠采用微生物检定法，其余均采用HPLC 法。）
第三节 氨基糖苷类抗生素
结构：链酶胍、链酶双糖胺（链霉素）、环己多元醇（苷元）。
典型药物：链霉素、庆大霉素、奈替米星、阿米卡星等。
理化性质：溶解性（水）、碱性、旋光性、水解性与稳定性（苷键）、紫外特性。
（注：链霉素在230nm 处有最大吸收，庆大霉素、奈替米星等无紫外吸收，可用于鉴别庆大霉素。）
a. 茚三酮反应：氨基糖苷类含α-氨基酸，反应显蓝紫色，可用于鉴别。
b. Molisch 反应：具有五碳糖或六碳糖，在盐酸作用下，与α-萘酚（紫红色）或蒽酮（蓝紫色）显色反应。 c. N-甲基葡萄糖胺反应：经水解后，在碱性条件下与乙酰丙酮、对二甲氨基苯甲醛反应，呈樱桃红色。 d. 麦芽酚反应：链霉素分特征反应。麦芽酚与Fe 3+作用，显紫红色。
e. 坂口反应：链酶胍的特有反应。反应产物显橙红色。
项目：有关物质（链霉素含链霉素B ）、组分测定（庆大霉素）、硫酸盐检查（络合法或HPLC 法）。
方法：HPLC-蒸发光散射法。（固定相为C18，流动相为三氟醋酸-甲醇。）
第四节 四环素类抗生素
结构：四并苯或萘并苯。
典型药物：土霉素、四环素、金霉素、米诺环素、多西环素等。
（注：四环素类抗生素的溶解度与pH 有关，强酸或强碱时易溶于水。）
*扩展 四环素的稳定性
a. 差向异构化（A 环）：pH2.0~6.0时，四环素/金霉素差向异构化产生差向四环素/金霉素。
b. 降解（C 环脱水）：pH ＜2时，四环素/金霉素脱水产生脱水四环素/金霉素。
c. 碱性降解：四环素在碱性条件时，产生异四环素，并具有荧光。
方法：HPLC 法、显色法（四环素/硫酸反应、三氯化铁反应）。
项目：有关物质（异构体、降解产物）、杂质吸光度、残留有机溶剂。
（注：抗生素类高分子杂质的检查方法：凝胶色谱法。）
方法：HPLC 。（填充剂为C18，流动相为醋酸铵-乙腈溶液。）
第十七章 合成抗菌药的分析
第一节 喹诺酮类药物的分析
结构：吡啶酮酸并联苯环、吡啶环或嘧啶环。
典型药物：诺氟沙星、环丙沙星、左氧氟沙星、氧氟沙星等。
（左氧氟沙星具有旋光性、而氧氟沙星和环丙沙星等无旋光性。）
a. 丙二酸反应：喹诺酮类药物（叔胺）的特有反应。
b. 其他：紫外、红外、色谱、HPLC 法。（略）
项目：工艺杂质（副产物、异构体）、降解产物、溶液的澄清度与颜色。
a. 非水溶液滴定法：测定吡哌酸等。
b. 紫外分光法：测定诺氟沙星等。
c.HPLC 法：ChP 除吡哌酸外喹诺酮类药的测定。
第二节 磺胺类药物的分析
结构：对氨基苯磺酰胺。
典型药物：磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、磺胺异噁唑等。
理化性质：溶解性（溶于酸碱）、熔融变色性、酸碱性（两性）、磺酰胺基特性。
a. 金属离子取代反应：甲噁唑/草绿色、异噁唑/暗绿色、磺胺嘧啶/黄绿色变为紫色。
b. 重氮化-偶合反应：略。
c. 红外分光法、HPLC 法：略。
项目：氯化物、炽灼残渣、酸度、溶液澄清度、有关物质（TLC 法）。
方法：HPLC 法（片剂）、NaNO 2滴定法（原料药）、非水滴定法。
第十八章 药物制剂分析概论
1、药物制剂检查包括：杂质检查、剂型检查、安全性检查。
2、剂型检查包括：重量差异与含量均匀度、崩解时限与溶出度、
3、剂型与安全性检查包括：装量、渗透压摩尔浓度、可见异物、不溶性微粒、无菌、细菌内毒素与热源等。 注：异物检查——灯检法、光散射法。
不溶性微粒检查——光阻法、显微计数法。
无菌检查——薄膜过滤法、直接接种法。
内毒素检查——鲎试剂检测。（凝胶法、光度测定法）
注：溶剂水的干扰——非水溶液滴定法。
溶剂油的干扰——有机溶剂稀释法、萃取法、柱色谱法。
抗氧剂的干扰——加掩蔽剂、加酸分解。
第十九章 中药制剂分析概论
1、中药的鉴别：性状鉴别、显微鉴别、理化鉴别、色谱鉴别。
2、中药的检查项目：杂质、水分、总灰分和酸不溶性灰分、重金属、农药残留、有关物质。
3、中药的其他杂质：黄曲霉素、乙醇量、膨胀度、酸败度。
第二十章 生物制品分析
1、生物制品分类：疫苗类（细菌类/病毒类/联合疫苗）、抗毒素及抗血清类、血液制品、重组DNA 。
2、质量要求：安全性、有效性、可接受性。
3、鉴别试验：免疫双扩散法、免疫电泳法、免疫印迹法、酶联免疫法。
4、检查内容：物理性状、蛋白质含量、防腐剂和灭活剂含量、纯度、相对分子量、安全检查、效力检查、杂质检查、水分、酸碱度等。
