1、目前,常用的植物细胞培养基种类有哪些?各有什么特点?
1)MS培养基特点是无机盐和离子浓度较高,是较稳定的平衡溶液。
2)B5培养基其主要特点是含有较低的铵,这是因为铵对不少培养物的生长有抑制作用。3)White培养基其特点是无机盐数量较低,适于生根培养
4)N6培养基其特点是成分较简单,KNO3和(NH4)2SO4含量高。
5)KM8P培养基其特点是有机成分较复杂,它包括了所有的单糖和维生素,广泛用于原生质融合培养。
2、简要说明MS培养基的基本组成。
MS培养基的大量元素主要包括硝酸铵(NH4NO3)、硝酸钾(KNO3)、磷酸二氢钾(KH2PO4)、硫酸镁(MgSO4?7H2O)和氯化钾(CaCl2,CaCl2?2H2O)五种化合物。
MS培养基中的铁盐是硫酸亚铁(FeSO4?4H2O)和乙二胺四乙酸二钠(Na2?EDTA)的螯合物,必须单独配成母液。
MS培养基的有机成分有甘氨酸、肌醇、烟酸、烟酸硫胺素和盐酸吡哆素。
MS培养基中的激素有生长素类、细胞分裂素
3、配制培养基时,为什么要先配制母液?如何配制母液?
1)配制母液不但可以保证各物质成分的准确性及配制时的快速移取,而且还便于低温保藏。2)基本培养基中的大量元素、微量元素、维生素等一般都分别配制成母液。
4、常用的灭菌方法有哪些,各有哪些优缺点?
1)湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)优点:高温高压蒸汽对生物材料有良好的穿透力,能造成蛋白质变性凝固而使微生物死亡,是一种最有效的灭菌方法。缺点:如果是对培养基或液体溶液灭菌,灭菌时间与需要灭菌的培养基或液体溶液的体积密切相关,时间不足达不到灭菌效果,时间过长培养基内的化学物质遭到破坏,影响培养基成分。
3)干热灭菌缺点:干热灭菌存在能源消耗大、浪费时间、安全性差问题
4)紫外线灭菌缺点:由于紫外线穿透物质的能力很弱,所以只适于空气中和物体表面的