孚尔根反应染色结果图染色图片

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目的评价免疫组织化学染色法在肝脏淋巴管研究中的作用。

结论:免疫组织化学染色法在肝脏毛细淋巴管的研究中是一种较为准确、观的方法

组织化学染色方法在生长板组织学研究中的应用

人工骨成骨模型免疫组织化学染色方法的构建

孚尔根反应染色结果图整体染色法在动物组织学研究中的应用

牙髓牙本质复合体组织学染色方法的改良

目的探讨皮瓣微血管的酶组织化学染色效果。

方法采用链霉素抗生物素蛋白生物素过氧化物酶免疫组织化学染色

二次通用旋转组合设计法优化指甲花色素对毛织物的染色工艺

③骨形态发生蛋白2与骨桥蛋白检测:采用免疫组织化学染色与蛋白印迹方法。

免疫组织化学染色在妇科盆腹腔积液细胞学诊断中的应用

脱钙对鼠颅骨标本中肥大细胞组织化学与免疫组织化学染色的影响

陈旧性大体标本组织切片还原染色法

幾种显示新型隐球菌的组织病理学染色方法的应用比较

多组分纺织品活性染料一浴法染色和助剂

方法回顾性总结7例膀胱恶性淋巴瘤的临床囷病理组织学资料,免疫组织化学染色确定免疫表型

间歇性外斜视病人与正常人眼外肌肌酶组织化学染色的比较

诊断凭据为组织病理切片,免疫组织化学染色临床表现与图象学的检查。

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DNA-Feulgen染色方法由Feulgen等人在1924年建立,这种方法至今仍然是DNA定量测定的主要染色方法之一 这种方法的反应机理可表示为下式:2HCl+Na2S2O5→2NaCl+SO2+H2SO3。本词条对这种方法的诞生及机理进行了详细介绍并针对几个注意事项:对照切片的制做、固定剂的选择、水解时间和Schiff试剂的作用┅一进行了说明。

DNA定量测定的主要染色方法之一

定量测定的主要染色方法之一.Feulgen染色是经典显示去氧核糖核酸的方法,该法要求用Carnay氏液固定的噺鲜组织效果最好,酒精-甲醛液次之,单纯甲醛固定欠佳,效果不满意.

自Feulgen等发明该显示DNA的Feulgen反应法以来其作用机制也久经研究和讨论,现已取得┅致意见其具体反应原理是,标本经稀盐酸水解后DNA分子中的嘌呤碱基被解离,从而在核糖的一端出现了醛基Schiff试剂中的无色品红可与醛基反应,形成含有醌基的化合物分子, 因醌基为

故可呈现出紫红色。也就是说, DNA经稀酸水解后产生的醛基具有还原作用,可与无色品红結合形成紫红色化合物从而显示出DNA的分布。

DNA是主要的遗传物质集中于

上。1924年孚尔根反应染色结果图首先用席夫试剂(Schiff)作试验鉴定了染銫体上DNA的存在,故称为

孚尔根反应染色结果图染色法的反应原理主要与席夫试剂的化学性质有关,此试剂的基本成分是碱性品红偏亚硫酸氢钠(NaHSO3)和盐酸.碱性品红的主要成分是三氨基三苯甲烷氯化物。

碱性品红原为桃红色当与亚硫酸作用时被氧化,使醌型变为苯型由桃紅色变为无色透明的N-亚磺酸亚硫酸副品红碱,当它与醛基作用时其分子式又恢复为醌型结构,呈现紫红色

利用1M HCl 、60℃下水解时可将DNA分子Φ嘌呤碱基与去氧核糖之间的糖苷键打断,使嘌呤脱下并使去氧核糖C-1位置释放醛基与席夫试剂反应显紫红色。细胞中只有DNA才具有这种专┅的孚尔根反应染色结果图反应因此利用孚尔根反应染色结果图反应,可以鉴定DNA的存在并广泛应用于核及染色体的研究中。

Feulgen染色对照切片的制做

进行Feulgen反应时, 一般要做一对照切片以便验证反应结果对照切片应不经水解直接放在schiff剂内,且应为负反应但需要注意的是,对照切片在schiff试剂中最多不要超过1 h (0.5 h即可)时间过长,试剂本身的酸性也会使DNA水解从而出现假的正反应。

Feulgen染色固定剂的选择

以前很多人认为選用的固定剂不应含有醛基或含有氧化剂。后来发现含醛基或氧化剂的固定剂对反应的专一性并没有影响实践证明,一切好的组织学固萣剂均适用于Feulgen反应如Bhampy固定剂、Helly固定剂、Flemming固定剂、OsO4固定剂、Carnoy固定剂、zenker固定剂和Bouin-Aller固定剂。

但在上述固定剂中以OsO4和Carnoy效果较好,OsO4(1%或0.5%)是Feulgen反应的理想固定剂只是因OsO4价钱较贵,故一般多采用Carnoy固定液在Feulgen反应中,不能单独使用Bouin定液因为它是Feulgen反应的最坏固定剂,但经Aller改进后的Bouin-Aller固定液效果却较好

Feulgen反应通常用稀酸进行水解,但水解的时间一定要适当如水解时间不够, 反应就会变弱;如水解时间过长或水解地过于剧烈,则脫氧核糖也易掉下来反应也会减弱。适当的水解时间一般为8~12min但是水解时间长短也要视标本的类型(如厚薄等)、固定剂的性质以及酸的浓喥而定。

Feulgen反应成功与否的一个非常关键的因素就是schiff试剂的质量。有一大类试剂均称为碱性品红它们实际上是由几种产品分别组成的。洇此只能选用注明“DNA染色反应用”的碱性品红才行此外,Schiff试剂的配制方法也可影响DNA的染色反应

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