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下列关于灭菌的说法中，不正确的是
A．灭菌是杀死一定环境中所有微生物的细胞，不包括芽孢和孢子B．对不同的生物材料，应当采取不同的灭菌方法C．培养基一般采用高压蒸汽灭菌法D．高压蒸汽灭菌法最终使菌体蛋白质凝固变性
题型：单选题难度：偏易来源：同步题
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据魔方格专家权威分析，试题“下列关于灭菌的说法中，不正确的是[]A．灭菌是杀死一定环境中所有..”主要考查你对&&微生物的实验室培养&&等考点的理解。关于这些考点的“档案”如下：
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微生物的实验室培养
微生物的实验室培养：1．培养基的概念、种类及营养构成 (1)概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。 (3)营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。2．无菌技术 (1)关键：防止外来杂菌的入侵。(2)具体操作 ①对实验操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒。 ②将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。 ③为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行。④实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围的物品接触。(3)消毒和灭菌
3、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基的方法：计算、称量、溶化、灭菌、倒平板。4、接种方法：平板划线法和稀释涂布法。（1）平板划线操作：①挑取他含菌样品：选用平整、圆滑的接种环，按无菌操作法挑取少量菌种。②划A区：将平板倒置于煤气（酒精）灯旁,左手拿出皿底并尽量使平板垂直于桌面，有培养基一面向着煤气灯（这时皿盖朝上，仍留在煤气灯旁)，右手拿接种环先在A区划3—4条连续的平行线(线条多少应依挑菌量的多少面定）。划完A区后应立即烧掉环上的残菌，以免因菌过多而影响后面各区的分离效果。在烧接种环时，左手持皿底并将其覆盖在皿盖上方(不要放入皿盖内)，以防止杂菌的污染。③划其他区：将烧去残菌后的接种环在平板培养基边缘冷却一下，并使B区转到上方，接种环通过A区（菌源区）将菌带到B区，随即划数条致密的平行线。再从B区作C区的划线。最后经C区作D区的划线，D区的线条应与A区平行，但划D区时切勿重新接触A、B区，以免极该两区中浓密的菌液带到D区，影响单菌落的形成。随即将皿底放入皿盖中。烧去接种环上的残菌。④等平板凝固后，将平板倒置。（2）稀释涂布法：是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，在适宜条件下培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。能够测定样品中活菌数的方法是：稀释涂布平板法。纯化大肠杆菌的无菌操作和菌种保存： 1．大肠杆菌 (1)特性：革兰氏阴性、兼性厌氧的肠道杆菌。 (2)用途：是基因工程技术中被广泛采用的工具。 2．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基 (1)计算：依据是培养基配方的比例。 (2)称量：牛肉膏比较黏稠，可同称量纸一块称取。牛肉膏和蛋白胨易吸潮，称取时动作要迅速，称后及时盖上瓶盖。 (3)溶化：牛肉膏和称量纸+水加热取出称量纸→加蛋白胨和氯化钠→加琼脂（注意：要不断用玻璃棒搅拌，防止琼脂糊底而导致烧杯破裂）→补加蒸馏水至100mL。 3.纯化大肠杆菌（1）方法 ①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。 ②稀释涂布平板法：将骏业进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。（2）鉴定：将接种后的培养基和一个未接种的培养基（对照组）都放入到37℃恒温箱中，培养12h和24h后，分别观察并记录结果。 （3）菌种保存
知识点拨：1、无菌技术操作原则：（1）操作前准备：①操作环境应清洁、宽敞、定期消毒；物品布局合理；无菌操作前半小时应停止清扫工作、减少走动、避免尘土飞扬。②工作人员应做好个人准备，戴好帽子、口罩，修剪指甲并洗手，必要时穿无菌衣、带无菌手套。（2）操作中保持无菌①工作人员应面向无菌区，手臂应保持在腰部或操作台台面以上，不可跨越无菌区避免面对无菌区谈笑、咳嗽、打喷嚏。②用无菌持物镊取用物品；无菌物品一经取出，即使未用，也不可放回无菌容器内；一套无菌物品仅供一位患者使用，避免交叉感染。 ③无菌操作中，无菌物品疑有污染或已被污染，应予更换并重新灭菌。（3）无菌物品保管：①无菌物品必须与非无菌物品分开放置。②无菌物品不可暴露于空气中，应存放于无菌包或无菌容器中，无菌包外须标明物品名称、灭菌日期，并按失效期先后顺序排放。③定期检查无菌物品的灭菌日期及保存情况。无菌包在未被污染的情况下保存期一般为7天，过期或受潮应重新灭菌。2、划线分离操作中的有关问题：（1）在操作的第一步以及每次划线之前都要灼烧接种环，在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。
②在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，以免接种环温度太高，杀死菌种。 ③在进行第二次以及其后的划线操作时'要从上一次划线的末端开始划线。每次划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 (2)进行恒温培养时，要将培养皿倒置的原因如果正放培养皿，则皿盖上形成的水滴会落入培 养基表面并且扩散开。如果培养皿中已形成菌落，则茵落中的细菌会随水扩散，菌落间相互影响，很难再分成单菌落，达不到分离的目的。因此恒温培养时，培养皿必须倒置。 (3)培养后判断是否有杂菌污染的方法 ①从菌落的形态看，是否湿润、透明、黏稠，呈何种颜色等等，是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标。 ②用显微镜镜检观察其形态、大小，看是否有菌丝、孢子、芽孢等，这也是区别细菌、酵母菌、放线菌和霉菌的关键指标。 知识拓展：1、对异养微生物来说，含C、N的化合物既是碳源，也是氮源，即有些化合物作为营养要素成分时并不是起单一方面的作用。2、并不是所有微生物都需添加特殊营养物质，有些微生物需添加，原因是它们自身缺乏合成这些物质所需要的酶或合成能力有限。3、含抗生素的牛奶不能发酵为酸奶的原因：牛奶发酵成酸奶是利用乳酸菌来完成的，乳酸菌属于细菌， 4、化学药剂的消毒方法，其作用原理是使细菌体内蛋白质变性，但是化学物质很难透过孢子或芽孢的坚硬外层进入细胞内，因此化学方法难以消灭孢子和芽孢。5、体积分数为70%的乙醇杀菌效果最强，浓度过低，杀菌力弱，浓度过高，使菌体表面蛋白质凝固形，成一层保护膜，乙醇分子不能渗入其内，因此杀菌效果受影响。 6、倒平板的方法：右手持盛培养基的试管或三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后用右手手掌边缘或小指与无名指夹住管（瓶）塞（也可将试管塞或瓶塞放在左手边缘或小指与无名指之间夹住。如果试管内或三角瓶内的培养基一次用完，管塞或瓶塞则不必夹在手中）。左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速例入培养基约15mL，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。7、在斜面培养基上接种时，其正确的操作顺序： ①用左手大拇指、食指和无名指夹住菌种试管和待接种的斜面试管，管口并齐，使斜面向上成水平状态 ②右手拧松棉塞，但不取下③右手拿接种环，在火焰上灼烧灭菌 ④在火焰边用右手无名指和小指夹两个棉塞，将它们取下，同时左腕转动，灼烧管口一周 ⑤将接种环伸入管内，让环先接触培养基上未长菌的部位，使环冷却，然后轻轻挑取少量菌体⑥在火焰旁边迅速将沾有菌体的接种环伸到培养基的底部，由里向外轻轻画蛇形细线 ⑦抽出接种环，再用火焰灼烧管口，并在火焰上方将棉塞塞上 8、自养型微生物与异养型微生物的培养基的主要差别在于碳源。9、平菇培养的操作程序：配制棉籽壳培养基，高压蒸汽灭菌，接种，培养。10、菌种的保存：对于频繁使用的菌种，可以采用临时保藏的方法；临时保藏的菌种一般是接种到试管的固体斜面培养基上；临时保藏的菌种容易被污染或产生变异；在临时保藏过程中，每3～6个月都要重新将菌种从旧的培养基上转移到新鲜的培养基上；
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953068040180415804058575882635大千生物很奇妙！说说土壤中的微生物大千生物很奇妙！说说土壤中的微生物初彤柳百家号外面的世界很精彩，大千生物更奇妙。地球的每一个角落中生活着大大小小无数的生物。这些生物之间或互生（井水不犯河水和平共处），或共生（相互依赖互通有无），或寄生（从其它生物体内汲取有机营养和能量），构成了复杂的生态系统。土壤中也有这样一个处于动态平衡的生态系统。有植物根系或其它地下器官及其残体，也有诸如田鼠鼢鼠等稍大一些的动物，蝼蛄蛴螬金针虫等昆虫，最多的是各种真菌、细菌、线虫等肉眼看不到的生物群体。自然条件下，这些生物处于一个动态的平衡状态。土壤中的微生物种类多数量庞大。但它们靠什么生活和繁衍呢？和其它生物一样，也是两样东西，一个是以葡萄糖、果糖等为主的有机营养，一个是能量。但不同的生物获取这些生命之源的方式不一样。有的是利用太阳能来得到的，比如绿色植物和一部分光合细菌及藻类等，叫做自养生物；有的是从其它生物那里拿来的，叫做异养生物。异养生物从其它生物获取有机营养与能量的方式往往也不一样。有的很霸道的直接从其它生物活体内掠夺过来，这种方式就是通常所说的寄生，有的异养生物稍微弱势一些，只能从死的生物体或组织里摄取有机营养，这个是腐生。还有相当一部分生物会有礼貌的从另一种生物体内获取到有机营养的同时，也会把自己从其它资源里得到的一些营养送给对方，这叫共生。土壤中的微生物之间除了寄生和共生以外，大多数还是互不干涉和平共处的，叫做共栖。不论是哪一类生物，其实对维护整个土壤生态世界的整体平衡都是有一定作用的。比如，镰刀菌，是多种植物的根腐病原菌，是农业生产管理中需要减少这种真菌的数量才能保障作物的健康生长。但是，从另一个角度上看，镰刀菌寄生植物根系加速根的腐烂，又促进了土壤有机物质的转换，从生态平衡角度来说是有意义的。很久之前就有科学家开始研究土壤微生物与植物生长之间的关系，但限于当时的研究条件和仪器设备等，这个过程比较漫长。目前，随着分子生物学的诞生及其研究手段的完善，这类研究越来越深入，很多问题也逐渐变得清晰了。在了解了一些土壤微生物及其与农业生产的关系之后，科学家们把这些微生物进行了人工培养和商业化生产，这就是目前被欧美划归到生物刺激素中的，微生物接种剂（microbial inoculants）。这些微生物接种剂产品可以用在种子、植物体表面和土壤中，通过增加植物营养供应水平、根的生物量与生长范围、植物对营养的吸收能力等几个机制来刺激植物生长。目前用在农业生产中的微生物接种剂主要有丛枝菌根菌（AMF）、根际细菌（PGPR）和植物生长促进细菌（PGPB）三大类。芽孢杆菌属于革兰氏阳性根际细菌类（PGPR），也是研究最深入的一大类微生物接种剂。芽孢杆菌这个名称的来历，是因为这类细菌在遇到恶劣的环境条件时会浓缩细胞质，形成椭圆形的内生孢子，当外界的环境有所好转以后就可以重新恢复常态进行活动。这种内生孢子就是所谓的芽孢。芽孢杆菌类细菌在自然界中几乎是无处不在的，在高PH值（嗜碱芽孢杆菌）、高温（嗜热芽孢杆菌）、高盐渍化（耐盐芽孢杆菌）的土壤中都有它们的存在。在我们日常的生活中也经常有芽孢杆菌的身影，比如引起炭疽热的炭疽芽胞杆菌、引起食物中毒的蜡状芽孢杆菌、引起面包和馒头等发粘的枯草芽孢杆菌等等。但若采取一些科学的利用方法，芽孢杆菌对人类也是有益的，比如芽孢杆菌能产生多种消化酶，帮助动物对营养物质的消化吸收，就可以作为养殖业的饲料添加剂。芽孢杆菌还可以作为除臭剂，分解产生恶臭气体的有机物质、有机硫化物、有机氮等，大大改善场所的环境。芽孢杆菌是一个属的细菌，它还包括巨大芽孢杆菌、蜡质芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌、地衣芽孢杆菌、多黏芽孢杆菌等等。其中，苏云金芽孢杆菌是早已经用于农业生产中的生物杀虫剂，我国上世纪九十年代末推广的抗虫棉就是通过转基因工程技术把苏云金芽孢杆菌的基因片段嫁接到了棉花基因中。枯草芽孢杆菌是目前科学家们研究原核生物细胞的一个模式生物，也已经广泛用在微生物接种剂中。芽孢杆菌中的许多种可以产生大量的各种各样的生物酶和各种次生代谢产物，它们在土壤中发挥各种机制，促进植物的生长。1、增溶土壤中的营养物质：众所周知，磷在土壤中常常处于难以溶于水的有机态或某些盐类，植物根系很难直接吸收。如何提高土壤中磷的利用率一直是农业生产中的一个主要课题。包括芽孢杆菌在内的一些土壤微生物已经被鉴定为土壤磷增溶剂。比如地衣芽孢杆菌和解淀粉芽孢杆菌分泌的乳酸、异戊酸、异丁酸和乙酸等有机酸中的羟基与羧基将不溶性磷酸盐中的阳离子螯合在一起，同时降低土壤的PH值，释放出磷酸根离子，使磷转化为可溶性状态。在含钾的成土岩石上施用巨大芽孢杆菌和胶质芽孢杆菌以后，可以显著增加土壤中有效钾的含量。这也是因为这些芽孢杆菌分泌产生的柠檬酸、草酸、酒石酸、琥珀酸等直接溶解了岩石中的钾或螯合了硅；2、细菌还在进化过程中形成了一个吸收铁的能力，使之在极低的铁离子浓度环境中也能够正常生长。这就是铁载体。细菌通过绑定或捕捉土壤中的铁离子，然后转运到其细胞体内，进而提高了土壤有效态铁离子的含量。芽孢杆菌具有这种能力；3、细胞分裂素一般在根尖和发育中的种子中合成，通过木质部转运到茎中调节植物的几个生长进程。芽孢杆菌也可以产生细胞分裂素。科学家在莴苣上接种枯草芽孢杆菌以后发现莴苣的细胞分裂素增加，其茎和根的重量增加了30%，使用地衣芽孢杆菌后的黄瓜叶片叶绿素含量明显增加；4、芽孢杆菌还可以帮助植物度过非生物因素造成的胁迫。比如，在干旱条件下，接种芽孢杆菌后植物的茎和根的生物量及含水量都有增加。芽孢杆菌有这么多的本事可以广泛应用于农业生产中，所以，目前国内外含有芽孢杆菌的微生物接种剂类产品很多。这两年有些企业推出的微生物接种剂从每克含几亿个孢子到几十亿不等，甚至还有号称每克含有500亿、1000亿的产品也已经出现在市场中。那么，是不是这些产品中含有的孢子数越多就越好吗？当然不是。因为一款好的微生物接种剂产品，必须同时具备以下特点才行。1、最优化的株系，和同一种作物有不同的品种之分一样，同样都是枯草芽孢杆菌，但它也有不同的株系，在其适应能力、生存和繁殖能力、为植物提供营养的能力等方面上也是有差别的。所以，一款好的微生物接种剂，首先要优化筛选出最适宜的微生物种类及其株系；2、最匹配的微生物种群，一般的微生物接种剂都往往同时含有多个菌种，那么这些菌种之间能否和谐相容也很关键。如果仅仅是简单的把几个微生物物种混合在一起，可能会因为微生物之间的拮抗性而使其在储运期间或使用后生物活性大大下降；3、最佳的制剂配方和生产工艺，商品型微生物接种剂需要考虑生产、储存、运输等环节中微生物的存活问题。目前困扰微生物接种剂在农业生产中效果不稳定的原因往往是制剂中的微生物菌种因为配方中没有合适其生存的营养成分而被饿死在储运过程中；4、有一个适宜其生存和繁衍的土壤环境和植物种类。国内越来越多的土壤因为掠夺式的种植和随意滥用肥料与农药等，变得更酸、更碱或更盐，土壤中原本存有的有益菌已经难以存活，接种新的微生物物种，也同样会遭受到恶劣环境的挤压。所以，尽管使用微生物接种剂可以改善土壤性质，但如果先采用其它措施适度改良土壤性状的同时或之后，再使用微生物接种剂的效果会更好。不同的植物根系分泌到土壤中的代谢产物或次生代谢产物是由差别的，对于同一种植物来说，其代谢或次生代谢产物可能会对一些土壤微生物物种有益，同时也会对另一些微生物物种有害，倘若这些被伤害的微生物恰恰是对植物有意的话，如何化解这个矛盾，就成为一个新的问题。所以，并不是随意使用一种微生物接种剂产品在任意一种植物上就一定会有好的效果。总起来说，并不是所有的微生物接种剂都是好的生物刺激素产品；即便是一款质量很好的微生物接种剂，但也不一定适合所有的土壤类型或植物种类；即便是适合某种土壤类型和植物种类的优质微生物接种剂产品，也需要合理的使用方法才能有好的效果。合理使用微生物接种剂需要在以下方面予以注意：1、先试验，筛选出合适的产品合适的剂量合适的使用时机等；2、在作物栽植前或栽植后的前期使用，给微生物一段适应、生存、繁衍的时间；3、对于已经非常恶劣的土壤，最好先采用其它非生物性改良措施适度调理土壤后，再使用微生物接种剂。比如适度减少施肥量、使用腐殖酸类或海藻提取物类产品等；4、和有机肥配合使用；5、注意一次性单位面积上的使用剂量。因为微生物接种剂既可以释放土壤中的一些营养成分，也可以产生一些植物激素等，如果一次性施用在有限面积的土壤中就可能会造成“肥害”或“药害”；6、注意与植物激素类产品避开或降低使用剂量；7、避免在强光、高温环境下保存和使用，也尽量不要和具有杀菌作用的化学产品直接接触使用。比如有的经济作物种植区为了防治土传性病害，有时候直接冲施硫酸铜、石硫合剂等对所有微生物都有伤害的产品，对微生物接种剂的效果肯定会有显著影响。和化肥，尤其是诸如氯化铵、碳酸氢铵等，混合使用，也会影响微生物接种剂的效果。本文仅代表作者观点，不代表百度立场。系作者授权百家号发表，未经许可不得转载。初彤柳百家号最近更新：简介:本人有丰富的领域写作经验。作者最新文章相关文章微生物孢子和胞子的区别_百度知道
微生物孢子和胞子的区别
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但有时候会形成担孢子 子囊孢子 却是有性孢子.这块知识呢 很烦 主要是那些名词 让人头疼.但一点 你要是明白那个孢子是怎么来的 就可以判断是不是有性孢子,凡是经过减数分裂而来的 都是有性孢子,而是休眠子、孢囊孢子、节孢子、厚垣孢子等等都属于无性的,那就复杂了微生物孢子和胞子的区别微生物有很多类 不同微生物的孢子概念不同.对于原核微生物的孢子.对于真核微生物,凡是经过有丝分裂（或者无丝分裂）而来的.酵母菌有性生殖中才会形成孢子——子囊孢子,那是有性生殖的产物.对于霉菌呢 分生孢子,一种是放线菌孢子,属于无性繁殖的,另一种有时候可能会指细菌芽孢（经常考这个概念）,就不是繁殖用的了,主要指2种
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微生物学思考题答案
绪论1、你如何使你的朋友相信微生物不仅仅是一种病原？尽管目前微生物仍在严重威胁人类的生存，但另一方面，我们必须强调，大多数微生物对人类是无害的。事实上，大多数微生物对人类社会还有巨大的价值。整个农业系统在许多方面都依赖微生物的活动。许多主要的农作物属于豆科植物，它们的生长同专一性细菌紧密相连，这些细菌可在植物的根部形成根瘤结构。根瘤结构中，大气中的氮转变成可用于生长的氮化物。根瘤细菌的固氮活动，减少了昂贵肥料的需要。微生物在农业上的另一个重要性在于，某些动物是反刍动物，这些主要的农业动物具有瘤胃，微生物在瘤胃中进行消化。没有这些微生物牛羊的饲养是不可能的。植物营养方面，微生物在碳、氮、硫这些重要营养成分的循环起着关键作用。土壤和水中的微生物可见这些元素转化成植物容易利用的形式。微生物与食品的关系，不仅仅是产生腐败变质等不利影响。奶制品的制造至少部分是借助微生物的活动，包括乳酪、酸乳酪和黄油，都是主要的具有经济价值的产品。泡菜、腌制食品和一些腊肠也归功于微生物的活动。可烘焙的食品及乙醇的制造也基于酵母菌的发酵。 微生物在能源生产方面也起着重要作用。天然气是细菌作用的产物，由甲烷细菌代谢产生。光营养的微生物能够收集太阳能生产生命有机体中的储存物――生物量。废物如生活垃圾、剩余谷物、动物废 1料等通过微生物转化微生物燃料――甲醇和乙醇。利用微生物清理被人类活动污染的大气――生物整治。利用微生物降解油污、溶剂、杀虫剂和其他环境污染物。通过基因操纵技术，能在微生物种生产出人类胰岛素。利用基因组学方法搜索带几百个目的蛋白的基因蓝图，然后将它们转入到合适的受体中由于生产重要的、有商业价值的蛋白质。在自然界中，它无限小，但作用无限大。2、胡克和列文虎克对微生物学的贡献有那些？科恩对微生物学的贡献有那些？1665年，罗伯特.胡克描述了霉菌的子实体结构，因此他是第一个描述微生物的人。1676年，列文虎克在研究辣椒水渗出的过程中发现了细菌，因此他是首次描述细菌的人。科恩为细菌学奠定了基础并且发现了细菌的内生孢子。3、19世纪前期，人类认识微生物世界的4大障碍是什么？什么技术使人类克服了这4大障碍？4大障碍――个体微小，外貌不显、杂居混生，因果不显技术――显微镜的发明，灭菌技术的应用，纯种分离技术的建立，纯种培养技术的建立。4、什么是纯培养？如何获得纯培养？为什么获得纯培养对微生物学的发展非常重要？纯培养――微生物学中把从一个细胞或一群相同的细胞经过培养繁 2殖而得到的后代,称纯培养。通过分离纯化的方法获得纯培养。重要性――通过研究纯培养，人们不仅可以证明特定微生物能引起特定疾病及一些其他方面的特征。纯培养技术的发明为细菌分类学、遗传学和其他分支学科的发展提供了非常关键的工具。是微生物学的最基本的研究方法。对于人们在很多时间内就承认微生物作为一门独立的学科起到了重要的作用。5、微生物学史可分为哪五期？ 各期的时间、实质、创始人是什么？ 史前期：公元前年，朦胧阶段，各国劳动人民不自觉地应用微生物；初创期：年，形态描述阶段，列文虎克用自制简易显微镜观察到许多“活的小动物”；奠基期：，生理水平研究阶段，巴斯德通过曲颈瓶试验推翻生命的自然发生说，创立种胚学说；柯赫提出“柯赫原则”； 发展期：，生化水平研究阶段，德国人布赫纳利用石英砂磨后酵母无细胞滤液中的“酒化酶”把葡萄糖发酵生产酒精和CO2； 成熟期：1653年至今，分子生物水平阶段，沃森和柯里克提出了DNA的双螺旋模型。6、解释一下用巴斯德烧瓶研究自然发生说的原理？若将烧瓶中的食品加热至沸腾，杀死其中的污染物，烧瓶冷却后，空气可重新进入，但颈部的弯曲防止了粒状物、细菌或其它微生物的进入。若食品不腐败，则证明腐败物品上的微生物来自于空气。
36、什么是柯赫定律？对微生物学的发展产生了怎样的影响？柯赫定律是由德国微生物学家罗伯特.柯赫提出的，用以验证特殊类型的细菌能引起特有的疾病。包括下列标准：①、这种微生物必须存在于患病动物中，而不能存在于健康个体中； ②、这一微生物可以离开动物体进行纯培养；③、将这种培养物接种到敏感动物体后，应当出现特有的疾病症状； ④、这种微生物可以从试验动物中再分离出来，并且可在实验室中进行再培养，培养出的细菌同原有微生物仍然相同。柯赫定律对传染病的研究起了重要的推动作用。它不仅用以证明特殊微生物引起特定疾病，而且由于强调了实验室培养，对微生物学的发展起到了巨大的推动作用。以柯赫定律作为指导，研究人员揭示了许多重要的人类和其他动物疾病的原因。这些发现使防止和治愈传染性疾病得以成功，并奠定了临床医学的基础。为将特定的微生物与某种特定疾病联系起来，人们必须能从培养物中分离到这种微生物――纯培养。纯培养技术的发明为细菌分类学、遗传学和其他分支学科的发展提供了非常关键的工具。这一最基本的微生物学研究方法，对于人们在很短时间内就承认微生物作为一门独立的学科起到了重要的作用。7、为什么说巴斯德和柯赫是微生物学的奠基人？这是由于巴斯德和柯赫为微生物学的建立和发展做出了卓越的贡献，使微生物学作为一门独立的学科开始形成。巴斯德彻底否定了“自然发生”学说；发现将病原菌减毒可诱发免疫性，首次制成狂犬疫苗， 4进行预防接种；证实发酵是由微生物引起的；创立巴斯德消毒法等。柯赫对病原细菌的研究做出了突出的成就：证实了炭疽病菌是炭疽病的病原菌，发现了肺结核病的病原菌，提出了证明某种微生物是否是某种疾病病原体的基本原则――柯赫原则，创建了分离、纯化微生物的技术等。8、微生物学发展史上曾出现过寻找重要病原菌的“黄金时期”，其主要原因是什么？微生物纯种分离技术的成功建立。9、李斯特成功的发明外科消毒术是受到怎样的启发？巴斯德对“酒病”的研究。10、人类已消灭的第一个传染病是什么？天花11、微生物有哪五大共性？其中最基本的是哪一个？为什么？微生物的五大共性：体积小，面积大；吸收多，转化快；生长旺，繁殖快；适应强，易变异；分布广，种类多。最基本的性质：体积小，面积大。原因：一个小体积、大面积的系统，必然有一个巨大的营养物质吸收面、代谢废物的排泄面和环境信息的交换面，并由此产生其余四个共性。12、什么是微生物？包括哪些类群？微生物是一切肉眼看不见的或看不清的微小生物的总称。微生物都是个体微小、构造简单的低等生物，包括属于原核类的细菌（真细 5菌和古生菌）、放线菌、蓝细菌、支原体、立克次氏体、衣原体；属于真核类的真菌（酵母菌、霉菌和蕈菌）、原生藻类和显微藻类；以及属于非细胞类的病毒和亚病毒。13、人类基因组的目的是什么？后基因组计划的目的是什么？微生物学与之有什么关系？人类基因组计划的目的是测定人类基因组中所有基因的位置和序列――也就是人体内所有的遗传物质。后基因组计划的目的――认识基因与基因组的功能人类基因组计划的工作基础是由微生物基因组测序工作发展而来的，微生物基因组较小，较易测定。利用微生物所作的实验将在很大程度上帮助我们解读人类基因组。 第一章
原核微生物1、当细胞变小时，使细胞具有了哪些优势？多数原核生物非常小的可能原因是由于这种小的特点使其具有重要的优势。例如第一，养分和废物进出小的细胞比大的细胞更容易， 6这样就加速了细胞代谢和生长。因为相对细胞体积来说，小的细胞比大的细胞有更多的可利用的表面。第二，生长速率在一定程度上依赖于养分交换的速率，所以小的细胞所具有的较高的表面积与体积比比大细胞能更好地支持其快速生长。从每单位可获得的资源来讲，小的细胞比大的细胞能快速的发育成更大的群落。第三，对所有生物，因为突变率是相同的，那么较大的细胞群落意味着更多的细胞分裂，这也预示着来自DNA复制过程中自然的错配所带来更多的突变积累。第四，突变是促使进化改变的源泉，加之原核生物是遗传单倍体，使得有益变异会立即表达，所以原核生物可快速适应改变的环境条件并且很容易地利用栖息地。2、比较革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和抗酸细菌的细胞壁。 革兰氏阳性菌的细胞壁有相当厚度的肽聚糖层，约占细胞壁的60-90%。肽聚糖层与细胞膜的外表面紧密相连。另含有少量磷壁酸，一般含蛋白质及脂类较少。缺少外膜和周质空间，消化酶酶类并不是保留在周质间隙中，而是被释放到周围环境中。革兰氏阴性菌的细胞壁比革兰氏阳性菌的薄，但更复杂。细胞壁中只有10-20%是肽聚糖，其余是大量的脂蛋白和脂多糖。细胞壁外有一层外膜，构成了细胞壁的外表面，并留下一个非常狭窄的周质间隙。细胞壁的内表面与细胞膜之间被一个较宽的周质间隙隔开。毒素和酶在周质间隙中保持一定浓度。抗酸细菌的细胞壁像革兰氏阳性菌一样比较厚，但其中含有60%的脂，而肽聚糖含量很少。73、哪些微生物具有周质间隙？在周质间隙中发生着什么？革兰氏阴性菌的细胞壁内表面与细胞膜之间有一个较宽的周质间隙。毒素和酶在周质间隙中保持一定浓度，帮助摧毁那些可能危害细菌的物质。根据生物体的不同，其中含有几种蛋白质，包括水解酶，食物分子的初步消化相关蛋白；结合蛋白，起始物质运输过程相关蛋白；化学感受器，是与趋化性反应有关的蛋白质。4、解释下列术语的相互联系：细胞壁、外膜、脂多糖、内毒素、类脂A、细胞死亡。外膜是位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层。脂多糖是位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一种较厚的类脂多糖类化合物。由类脂A、核心多糖和O-特意侧链三部分组成。类脂A是革兰氏阴性菌致病物质内毒素的物质基础。因而内毒素只在细胞死亡后经自溶或人工裂解时才释放。5、列出肽聚糖单体组分。肽聚糖单体包括三种成分：双糖单位，短肽链（一般为四肽），肽桥。6、为什么细菌细胞壁的坚硬层称为肽聚糖？肽聚糖结构的细胞壁坚硬性的化学原因是什么？细菌细胞壁中的一层坚硬层是一种多糖类物质。这种物质由两种糖衍生物，即N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸及少量特殊氨基酸组成。这些组分连接而形成重复结构，因而称肽聚糖。肽聚糖的基本结构是一个围绕细胞的一个接一个肽聚糖链形成的 8片状结构，由肽聚糖联形成的片层与氨基酸形成的四肽交联联结起来。聚糖链中连接糖分子的糖苷建非常强，这些链被氨基酸交联起来时，肽聚糖结构的全部力量显现出来，交联连接越完全刚性越强。7、构成革兰氏阴性菌的LPS层的组分有哪些？LPS是革兰氏阴性菌细胞壁外膜中的脂多糖层的简称。是一种脂多糖复合物。LPS中的多糖部分由两部分组成：核心多糖和O-特异侧链。LPS中的脂类部分指的是类脂A。8、孔蛋白的功能是什么？位于革兰氏阴性菌的细胞壁的何处？ 孔蛋白的功能是作为一个通道，使亲水性的低分子质量物质得以进出。包括特异性和非特异性两类。非特异性孔蛋白形成“充水”的通道，任何小分子物质都可以通过。特异性孔蛋白含有一种或一群结构相关物质的特异性结合位点。孔蛋白位于革兰氏阴性菌的细胞壁的外膜中。9、细胞的什么组分具有内毒素的特性？细菌细胞壁脂多糖层的部分尤其是类脂A具有内毒素特性。10、为什么乙醇很容易使革兰氏阴性菌脱色，而革兰氏阳性菌不行？ 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁结构上的差异被认为在革兰氏染色反应中有所不同。革兰氏染色中，细胞内形成一种不溶性的结晶紫-碘复合物，这种复合物可以用乙醇从革兰氏阴性菌中抽提出来，但不能从革兰氏阳性菌中抽提出来。因为，革兰氏阳性菌有由几层肽聚糖形成的很厚的细胞壁，能被乙醇脱水，导致闭上小孔更小甚至关闭，从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物从细胞中逸出。相反，革兰 9氏阴性菌中乙醇很容易渗入富含脂质的外膜，将结晶紫-碘复合物从细胞中抽提出来。11、没有细胞壁的细胞如何生活？它们或是具有独特的坚韧的膜（某些支原体的细胞膜中含有固醇），或是因为它们生活在具有等渗保护性的生境中。12、为什么蔗糖能够稳定被溶菌酶溶解的细菌细胞？蔗糖不能渗入细胞中，将其加入到细胞悬液中，使细胞内外溶质的浓度保持平衡。溶菌酶仍能消化肽聚糖，但水不能进入细胞，裂解不会发生。13、一句话解释为什么离子型分子不易通过细胞膜？细胞质膜内部的疏水性使它形成了一层紧密的扩散屏障。一些小的疏水性分子可以通过扩散穿过膜，但亲水性的带电荷分子（离子）不能通过，必须经过特殊的运输过程。14、一句话描述单位膜的结构。由磷脂双分子层组成，蛋白质嵌入其中。（因为每个磷脂分子形成半个“单位”而得名。）15、什么是古生菌？主要有哪些类群？古生菌是一群具有独特基因结构或系统发育生物大分子序列的单细胞生物，主要包括一些独特生态类型的原核生物。主要类群包括：极端嗜盐古生菌、产甲烷古生菌、极端嗜热古生菌、无细胞壁的古生菌-热原体属。16、古生菌在细胞壁与细胞膜方面的特征。10古菌的细胞壁成分包括假肽聚糖（与肽聚糖结构类似）、独特的多糖、硫酸化多糖、糖蛋白、蛋白质。古菌的细胞膜主要由磷脂组成，但是具有多样性，亲水头与疏水尾间通过醚键而不是酯键相连，还存在着独特的单分子层膜或单、双分子层混合膜，而真细菌或真核生物的细胞质膜都是双分子层。17、细菌会形成什么形式的细胞质内含物？主要有两大类：颗粒性内含物和囊状内含物。其中颗粒性内含物没有被膜包裹，内含物质地致密，在细胞质中不易溶解。如糖原颗粒、聚磷酸盐颗粒（异染粒）、硫粒。囊状内含物是指其外具有特别的膜包围而形成的。如聚β-羟丁酸颗粒、磁小体等。17、PHB和磁小体的组成及功能是什么？PHB是聚β-羟丁酸颗粒的简称，化学成分是脂类，功能是作为碳源或能量的储存物。磁小体是细胞内Fe3O4颗粒。赋予细胞两极磁性，使其对磁场有反应，推测可能是引导细菌向沉积物移动，那里的O2水平较低。18、气泡的特点及功能。气泡是由蛋白质构成的纺锤型的富含气体的结构，中空且有硬度。不透水和溶质，但对大多数气体来说是可透的。因为允许气体自由透过，所以气泡内的气体组分和压力与悬浮物的气体是一样的，并且因为气泡的密度仅为细胞的5-20%，所以气泡的存在降低了细胞的密度，从而增加了浮力。这种运动策略特别是对水生光养生物有利，因为它使生物垂直调整在水中的位置，找到最适于光合作用的光照强 11度。19、在什么条件下会生成PHA或糖原？当环境中碳源过剩时生成PHA或糖原。20、为什么革兰氏阳性菌不能像化能无机营养型的硫氧化菌一样积累硫？元素硫是以硫小体的形式储存在细胞壁周质中，而不是细胞质中。革兰氏阴性菌细胞壁中具有周质，化能无机营养型硫氧化菌属于革兰氏阴性菌，革兰氏阳性菌细胞壁中没有周质结构，因而无法积累硫。21、什么是DAP？存在于细菌的何种结构中？具有何种功能？吡啶二羧酸，简称DAP，是细菌内生孢子（芽孢）中特有的物质。芽孢中富含钙离子，多数钙离子与吡啶二羧酸结合，形成吡啶二羧酸钙复合物。该复合物的作用是降低内生孢子中水的利用率，降低核心含水量，从而大大增加内生孢子的抗热性。22、什么是SASP？功能是什么？SASP是小酸溶性芽孢蛋白。在芽孢形成过程中产生。功能有两种：一是通过与核心DNA紧密结合，保护其免受紫外辐射、脱水及干热的损害。二是还可作为内生芽孢形成新营养细胞生长的碳源和能源。23、简述芽孢和营养细胞在结构、化学组成和抵抗极端环境条件的能力有何不同。芽孢是使某些细菌产生的一种高抗性分化的细胞。与细菌营养细胞在结构、化学组成和抗性方面有明显不同。12结构上比营养细胞更复杂，具有许多层。与营养细胞在结构上的不同之处主要在核壁之外的层次结构。最外层称为孢外壁，由一薄层蛋白质覆盖。其内是芽孢衣，由多层芽孢特异性蛋白组成。芽孢衣下面是皮层，由松弛的交联肽聚糖构成。皮层之内是核心，含有核壁、细胞质、拟核、核糖体和其他细胞必需物质。化学组成上，有一种芽孢特有的物质，称为吡啶二羧酸，它可与芽孢中富含的大量钙离子结合，形成吡啶二羧酸钙，与芽孢耐热性有关。另一种特殊的物质是小酸溶性芽孢蛋白（SASP）。可与核心DNA结合，保护其免受紫外辐射、脱水及干热的损害。二是还可作为内生芽孢形成新营养细胞生长的碳源和能源。细菌芽孢在抗热程度上是非常突出的，即使高压灭菌在121℃下可杀死有内生孢子的大多数，但有些高抗热性的细菌的内生孢子可在高达150℃下生存。对其他有害因素，如干旱、紫外辐射、强酸或强碱及化学消毒剂均有很强抗性，因而它可保持一段相当长的休眠期。24、说明细菌鞭毛的结构与运动方式。细菌鞭毛结构主要包括三部分：基体、鞭毛钩、鞭毛丝。每根鞭毛都是由鞭毛蛋白构成，通过鞭毛钩与基体相连。基体是由一组环围绕着一条中心杆或轴组成。革兰氏阴性菌一对嵌入细胞膜的环（S-M环），另一对环与细胞壁上的肽聚糖（P环）和脂多糖层（L环）相连。革兰氏阳性菌只有相互分离的S环和M环。 运动方式：旋转式25、简述证明细菌运动方式的实验。13证明细菌运动方式的实验是“拴菌试验”。方法是：取一端长有单根鞭毛的细菌，使鞭毛的游离端被相应的抗体牢牢“拴”在载玻片上，然后在显微镜下观察细胞在做打转还是伸缩运动。结果发现是在不断打转，从而确认细菌鞭毛的运动机制是旋转式而非挥鞭式。26、细菌多糖层的功能。多糖层在细菌中有许多功能。第一，有助于微生物吸附在固体表面。致病微生物通过表面多糖的介导，与宿主组织的表面组分发生特异性结合；在非致病菌生物膜的形成中起关键作用。第二，保护作用。有v膜的致病菌可免于宿主免疫系统的吞噬细胞识别并破坏；多糖层结合的大量水分，可使菌抵御干燥的危害。27、简述菌落、菌苔及生物被膜的异同点。菌落：单个微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度可以形成肉眼可见得有一定形态结构的子细胞生长群体。
菌苔：微生物在固体培养基上长成的一片密集的微生物群落。 生物膜：带有多孔粘液物质并附着在一个表面上的微生物细胞群落。28、明胶半固体培养基与琼脂半固体培养基在应用上有何不同？ 明胶半固体培养基：主要用以检测微生物是否产生胞外蛋白酶。 琼脂半固体培养基：细菌的动力观察、趋化性研究、厌氧菌的培养、计数等、细菌酵母菌的保藏。29、链霉菌中的孢子和孢子形成过程与芽孢有何区别？14链霉菌中的孢子是其繁殖结构，芽孢是休眠结构。链霉菌生长发育成熟后，气生菌丝转化为孢子丝，孢子丝顶端通过产生横膈膜的方式使孢子丝分裂成为一串分生孢子；或菌丝顶端产生孢子囊，孢子囊成熟后，释放出大量的包囊孢子。芽孢是细菌生长发育到一定阶段时，营养细胞的DNA浓缩形成束状，由于质膜内陷，前芽孢双层膜形成，合成吡啶二羧酸，皮层合成后，再合成芽孢衣，最终芽孢囊裂解。30、为什么称蓝细菌为“先锋生物”？蓝细菌为何会成为“先锋生物”？因为蓝细菌分布广泛，包括各种水体、土壤中和部分生物体内外，在岩石表面和其他恶劣环境（高温、低温、荒漠和冰原等）中都可找到它们的踪迹。所以被称为“先锋生物”。因为蓝细菌细胞中含水量丰富，具有可储存营养物质的荚膜、能进行光合作用的类囊体及可固定CO2的羧酶体，并具有抗干燥的厚垣孢子，所以可成为“先锋生物”。31、什么是异型胞？什么是静息孢子？它们的作用各是什么？异型胞：是存在于一些丝状蓝细菌细胞链的中间或末端中的形大、壁厚、专司固氮功能的特化细胞。静息孢子：是长在蓝细菌细胞链中间或末端的形大、壁厚、色深的休眠细胞，富含储藏物，能抵御干旱等不良环境。32、简述蓝细菌的生态学意义。蓝细菌广泛分布于自然界的陆地、淡水及海洋中。总的说来，它 15们比藻类更能耐受不良的环境，通常在恶劣环境中，蓝细菌是主要或唯一的光养生物。可能是地球上第一种释放氧气的光合微生物，把大气从无氧转变成有氧。33、与其它原核细胞相比，为什么支原体需要更强的细胞膜？主要是因为支原体在进化过程中失去了细胞壁，因而需要更强的细胞膜起到保护作用。34、支原体细胞膜中含有什么物质使其更稳固？支原体细胞膜中含有的能使其更稳固的物质主要是甾醇，另外，有些支原体还含有脂多糖，该物质共价结合与膜上，也可帮助稳固细胞膜。35、如何区分枝原体、衣原体、立克次氏体和病毒？16第二章
真核微生物1、为什么原核生物缺少线粒体，仍能完成相应功能？线粒体的功能是进行呼吸作用和氧化磷酸化。原核生物细胞中没有线粒体，但在细胞膜上存在很多酶，可参与生物能的合成过程。2、大部分原核生物的细胞膜中缺少类固醇。真核细胞中类固醇有什么作用？真核细胞的细胞膜中含有固醇，其作用是增加了膜的刚性，对真核细胞保持其细胞膜的完整性有重要意义。因为真核生物细胞的表面积/体积比值低于原核细胞，使细胞膜处于更大压力之下，固醇帮助细胞承受住这种压力。3、比较原核生物和真核生物染色体的数目和结构。原核生物中一般只有一条染色体，一般为环状DNA形式存在于核区，通常不结合蛋白质。大多数真核生物的细胞核中有成对的染色体，每条染色体都含DNA和组蛋白。细胞分裂过程中，高度盘绕折 17叠形成紧密的染色体结构。4、简述真核微生物的主要类群。主要包括植物界的微藻、动物界的原生动物、菌物界的真菌、黏菌和卵菌。5、简述叶绿体中基质与类囊体的区别。基质：叶绿体的内膜包围着叶绿体腔，这个腔被称为基质。基质中含有各种无机盐和其他的一些有机物，如糖类，ATP和蛋白质等，其中最重要的是与光合作用暗反应有关的酶和少量的DNA。类囊体：叶绿体基质中由单层膜围成的扁平小囊。也称囊状结构薄膜。类囊体膜上含有光合色素和电子传递链组分，是光合作用光反应的进行部位。6、什么是内共生理论？列举几项证据。内共生理论：真核细胞的细胞器源于那些与未来真核细胞有共生关系的原核细胞。证据：①线粒体与叶绿体的大小与原核细胞相近②二者有自己的DNA并是与原核生物相似的单个圆环形式70S核糖体 ③有自己的并与原核细胞相似的④二者的DNA、核糖体执行蛋白质合成功能（真核生物由核DNA 控制）⑤二者独立于真核细胞分裂周期，以二等分裂方式分裂⑥双层膜结构类似革兰氏阴性菌的细胞膜18⑦叶绿体结构类似原核蓝细菌7、比较真核生物与原核生物核糖体的不同。原核生物核糖体比真核生物核糖体小，由RNA和蛋白质组成，沉降系数是70S，亚基的沉降系数是50S和30S。真核生物核糖体比原核生物核糖体大，大约60%是RNA和40%蛋白质，沉降系数是80S，亚基的沉降系数是60S和40S。8、光面内质网与粗面内质网有何不同？光面内质网上没有核糖体的附着，参与脂类的合成和碳水化合物代谢，粗面内质网上有核糖体的附着，可与核糖体一起参与糖蛋白的合成。9、为什么发生在溶酶体中的活性最好与细胞质隔离开？溶酶体中含有各种消化酶，能分解蛋白质、脂肪、多糖等大分子物质。这些酶的活性是非特异性的，基于其裂解活性，如果不用膜包围起来有可能毁掉重要的细胞大分子，所以最好将溶酶体于细胞质隔离开来。10、除了框架支撑作用，微管还有什么其它的功能？微管除具有框架支撑作用外，还在细胞运动方面起重要作用。包括细胞内部的运动（细胞分裂时染色体的分离）和生物体自身的运动（如具有鞭毛的真核细胞的鞭毛运动）。11、比较原核生物和真核生物鞭毛的结构和运动方式。细菌鞭毛结构主要包括三部分：基体、鞭毛钩、鞭毛丝。每根鞭毛都是由鞭毛蛋白构成，通过鞭毛钩与基体相连。基体是 19由一组环围绕着一条中心杆或轴组成。革兰氏阴性菌有一对嵌入细胞膜的环，另一对环与细胞壁上的肽聚糖和脂多糖层相连。 原核生物鞭毛运动方式：旋转式真核生物鞭毛结构为“9+2”型。它是由膜包围的两根中心微管和九对周围微管组成。每根微管几乎与原核生物整个鞭毛的大小相同。 真核生物鞭毛运动方式：挥鞭式12、真核生物细胞壁的化学组成是什么？主要构成如何？很多单细胞真核生物都有细胞壁，没有一种含有细菌特有的肽聚糖。藻类细胞壁主要由纤维素组成，但有一些含有其它多糖。 真菌细胞壁含纤维素或几丁质，或两者皆有。原生动物有一层柔软的外部覆盖物，称为表膜。13、酵母菌的5个特点。并列出各个特点的例外。①个体一般以单细胞状态存在；形成假菌丝时例外②多数营出芽繁殖；裂殖酵母属例外③能发酵糖类产能；有氧时可通过有氧呼吸产能④细胞壁常含甘露聚糖；另外含有葡聚糖，为其细胞壁提供支撑 ⑤常生活在含糖量较高、酸度较大的水生环境；有些分布于油田，可使石油脱蜡。14、什么是酵母纤维素？其中的什么成分赋予了细胞壁支持和保护的功能？酵母纤维素是酵母菌细胞壁的主要成分，构造成三明治状――外 20层为甘露聚糖，内层为葡聚糖，中间夹着一层蛋白质。酵母纤维素中的葡聚糖赋予了细胞壁支持和保护的功能。15、如何制备酵母菌原生质体？酵母纤维素可用蜗牛消化酶去除，从而使酵母细胞转变成酵母原生质体。16、比较酵母菌在有氧或无氧条件下细胞中线粒体的不同。 有氧条件下，酵母菌细胞中形成许多杆状或球状线粒体；缺氧条件下，酵母菌细胞中形成无嵴的、没有氧化磷酸化功能的线粒体。17、简述酵母菌的繁殖方式。酵母菌的繁殖方式主要有两种：无性生殖和有性生殖。无性生殖主要包括芽殖、裂殖及产生各种无性孢子的方式实现；有性繁殖主要是通过产生子囊孢子的方式实现。18、解释什么是假菌丝。在良好的营养和生长条件下，酵母菌生长迅速，几乎在所有营养细胞上都长出芽体。如果长出的一连串芽体与母细胞大小相近又不立即分离，其间仅以较小的面积相连，这种结构被称为假菌丝。19、简述酵母菌三种生活史类型及各自代表种类。酵母菌主要有以下三种生活史。⑴ 营养体能以单倍体或二倍体形式存在例如酿酒酵母。特点：21一般情况下都以营养体状态进行出芽繁殖；营养体既能以单倍体也能以二倍体形式存在；特定的条件下才进行有性繁殖方式：子囊孢子发芽成营养细胞，并不断出芽生殖；两个不同性别的营养细胞接合成二倍体营养细胞；二倍体细胞在一定条件下转变成子囊，经减数分裂后产4个子囊孢子，然后释放。⑵营养体只以单倍体形式存在例如八孢裂殖酵母。特点：营养体为单倍体；无性繁殖为裂殖；二倍体细胞不能独立生活，此期极短。方式：单倍体营养细胞进行裂殖；两个不同性别的营养细胞接触后发生接合，形成双倍体的核，经减数分裂后形成8个子囊孢子；破壁，释放子囊孢子。⑶营养体只以二倍体形式存在例如路德氏酵母。特点：营养体为二倍体,不断进行芽殖，此阶段较长；单倍体阶段仅以子囊孢子的形式存在，不能进行独立生活；单倍体的子囊孢子在子囊内 22发生接合。方式：单倍体子囊孢子在子囊内成对接合；接合后的二倍体营养细胞破壁独立生活，大量芽殖；二倍体营养细胞变成子囊，其核发生减数分裂，形成4个单倍体子囊孢子。20、如何区分酵母菌与霉菌？形态上――酵母菌为单细胞，卵圆形，无色；霉菌为多细胞，常有一定颜色结构上――酵母菌具有细胞壁、细胞膜、细胞核、细胞质、液泡等结构；霉菌具有特殊的孢子头形状生殖方式上――酵母菌多为出芽生殖，极少数情况下产生孢子；霉菌主要通过产生孢子的方式菌落形态――酵母菌菌落为光滑的；霉菌菌落为绒毛状的21、菌丝球通常何种情况下出现？在液体培养基中生长时，具有菌丝的微生物会形成菌丝球。22、霉菌菌丝体的延伸方式。霉菌菌丝体的延伸是由其菌丝顶端细胞的不断延伸而实现的。随着顶端不断向前伸展，细胞壁和细胞质的形态、成分都逐渐变化、加厚并趋向成熟。23、霉菌菌丝体的特化形式有哪些？各自的作用怎样？霉菌的菌丝体分两类，一类是特化的营养菌丝体，另一类是特化 23的气生菌丝体。特化的营养菌丝体中，与营养吸收有关的是假根与吸器；与附着有关的是附着胞和附着枝；与休眠有关的是菌核与菌索；与延伸有关的是匍匐枝；与捕食线虫有关的是菌环与菌网。特化的气生菌丝有简单和复杂之分。简单的子实体有无性的分生孢子头和孢子囊以及有性的担子；复杂的子实体包括无性的分生孢子器和分生孢子座以及有性的子囊果（闭囊壳、子囊壳和子囊盘）。 25、霉菌产生的无性孢子和有性孢子分别有哪些？无性孢子：游动孢子、孢囊孢子、分生孢子、节孢子、厚垣孢子 、芽孢子有性孢子：卵孢子、接合孢子、子囊孢子、担孢子 26、比较细菌、放线菌、酵母菌和霉菌菌落的特点。24 25 27、何谓锁状联合？ 担子菌双核菌丝细胞增殖的一种独特方式。因在顶端细胞分裂过程中有一个细胞核必须通过该细胞上伸出的一个喙状突起输送到后一个细胞中，故称锁状联合。第三章
病毒1、什么是病毒？病毒是一类有核酸和蛋白质或加上其他少数成分组成的非细胞超显微生物，其本质是一类可在宿主细胞内进行自身复制的遗传因子。以感染态和非感染态两种状态存在。2、怎样区别病毒粒子和细胞？病毒粒子在很多方面与细胞不一样。细胞同时含有DNA和RNA，而病毒粒子只含有一种类型的核酸――DNA或RNA。细胞能生长和分裂，但病毒不能。病毒复制必须由病毒粒子首先侵染一个细胞，然后控制宿主细胞内合成机制制造装配新病毒粒子所需的部件。被感染的细胞一般会形成几百到几千个新病毒，然后死亡。3、简述病毒的组成及各组成成分的相关功能。病毒粒子通常是由核衣壳构成，有些病毒核衣壳之外还有一层囊膜。核衣壳包括由核酸组成的核心和一个由蛋白质构成的衣壳。前者携带着病毒的遗传信息；后者具有保护和决定病毒外形的作用，在某些病毒的吸附过程中衣壳也起着关键的作用。由于被膜来自于宿主细 26胞，所以被膜的存在有利于使病毒“躲”过宿主免疫系统的攻击，也可通过与宿主细胞膜融合，帮助病毒感染新的细胞。4、衣壳和衣壳粒的区别。衣壳是包围着病毒核酸的蛋白质外壳，由许多衣壳粒组成。 衣壳粒是组成病毒衣壳的蛋白质亚单位，是电子显微镜下可见的有一定形状的构造。5、裸露病毒和有被膜病毒的差异。具有被膜的病毒在其衣壳外还包有特定的双分子层膜。这层膜是病毒在宿主细胞内完成装配后出芽或穿越一层或几层膜时得到的，病毒的核酸和来自宿主膜的成分共同决定了被膜的组成。只有衣壳没有被膜的病毒称为裸露病毒。被膜对病毒起到保护作用，有利于使病毒“躲”过宿主免疫系统的攻击，也可通过与宿主细胞膜融合，帮助病毒感染新的细胞。反之，被膜也很容易被破坏。而裸露病毒对能破坏被膜的环境条件有更强的抗性。6、简述病毒粒的几种对称体制及其相对应的特殊外形。并各举一例。 病毒粒的对称体制只有两种，即螺旋对称和二十面体对称。另一些结构复杂的病毒，实质上是上述两种对称相结合的结果，故称作复合对称。螺旋对称无包膜则通常形成杆状如烟草花叶病毒或丝状如大肠杆菌的M13噬菌体；有包膜则会形成如流感病毒样的卷曲状或如狂犬病毒样的弹状；27二十面体对称一般会形成球状，如腺病毒或疱疹病毒；复合对称若无包膜则会形成蝌蚪状如大肠杆菌的T偶数噬菌体或砖状如痘病毒。7、试比较病毒的几种群体形态。包涵体――宿主细胞被病毒感染后，在细胞内产生的一种有一定形态的病变结构。噬菌斑――将噬菌体稀释液接种于布满敏感细菌的平板上，经一定时间培养，以每一母噬菌体粒子为中心，形成的一个圆形、透明有一定特征的溶菌区域。枯斑――植物病毒感染植物后，在叶片上出现的一个个坏死的病灶。空斑――人工培养的单层动物细胞感染病毒后，也会形成类似噬菌斑的动物病毒群体。病斑――单层动物细胞受到肿瘤病毒的感染后，使动物细胞恶性增生，形成类似细菌菌落的病灶。8、病毒的命名和分类的权威机构是什么？由它规定的病毒的命名和学名书写规则怎样？病毒的命名和分类的权威机构是国际病毒分类委员会（ICTV）。 由它规定的病毒的命名和学名书写规则是一个类的名加上一个数字，采用英文的普通名字，不用拉丁文的双命名法。9、病毒分类单元中“科”“属”“种”的范围。科――ICTV使用的最高分类单元，依据核酸类型、衣壳对称性、 28有无被膜或大小。属――虽已设立，但因新出现，所以接受慢。种――有同样的基因组和宿主关系。10、以正确顺序写出病毒复制的五个步骤。吸附、侵入、生物合成、装配、释放。11、病毒增殖吸附过程中是如何实现病毒与宿主的特异性的？病毒粒子吸附宿主细胞是一个高度特异性过程。无论是裸露病毒还是有囊膜的病毒，其表面由一种或多种蛋白质，能够与特异细胞表面称为受体的组分发生相互作用。这些受体是细胞上正常的表面组分，在细胞中执行正常的功能，其中包括涉及细胞与细胞间识别或免疫系统的大分子物质。病毒粒子与细胞吸附的专一性，可通过二者间的电荷和氢键、空间结构的互补性及疏水性作用和范得华力实现。12、比较噬菌体和动物病毒复制过程中五个步骤的区别。2913、比较噬菌体增殖的一步生长曲线中的潜伏期和裂解期、隐晦期和胞内累积期。潜伏期――噬菌体核酸注入宿主细胞后，至第一个成熟噬菌体粒子释放前的一段时间。裂解期――从宿主液出现侵染性，至侵染性不再增高的一段时间。 隐晦期――潜伏期的前期，这时人为裂解宿主细胞，其裂解液无侵染性，细胞处于复制核酸和合成蛋白质衣壳阶段。胞内累积期――潜伏期的后期，这时人为裂解宿主细胞，其裂解液有侵染性。细胞内开始装配噬菌体粒子，可用电镜观察到。14、什么是噬菌体效价？常用的测定方法是什么？其优点如何？ 噬菌体效价――指每毫升试样中所含有的具侵染力的噬菌体粒子数。测定方法――双层平板法30优点――弥补了底面不平的缺陷；使噬菌斑处于同一平面；上层较稀的琼脂使噬菌斑较大，较易计数。15、什么是噬菌斑形成单位？什么是成斑率？噬菌斑形成单位――噬菌体落在较近位置会只产生一个噬菌斑，这被称为噬菌斑形成单位。成斑率――同一试样中根据噬菌斑计算的效价与用电子显微镜观察直接计算出来的效价之比值。16、比较噬菌体的溶源现象和裂解周期。溶源现象是指温和性噬菌体侵入宿主细胞后，仅以前噬菌体状态存在而不引起宿主细胞裂解的现象。裂解周期又称为裂解性循环，是指每一代烈性噬菌体所经历的繁殖过程。包括吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五个阶段。17、带有温和性病毒的宿主具有什么优势？这样的细胞如何检出？ 优势――带有温和性病毒的宿主，病毒基因组是整合进宿主细胞染色体并且裂解反应被抑制的状态，称为溶原态。溶原态赋予了宿主细胞新的遗传特性，溶原状态下，病毒的阻遏蛋白不但抑制原噬菌体中裂解基因的表达，还阻遏新进入细胞的相同病毒基因的表达，因此溶原菌对同种类型病毒的感染具有免疫力。检出――将少量溶原菌与大量的敏感性指示菌相混合，然后与琼脂培养基混合倒一个平板，经培养后溶原菌就一一长成菌落。由于溶原菌在细胞分裂过程中有极少数个发生自发裂解，其释放的噬菌体可不断侵染溶原菌菌落周围的指示菌菌苔，于是就形成了一个个中 31央有溶原菌的小菌落，四周有透明圈围着的这种独特噬菌斑。18、用于病毒培养的最重要的三种细胞培养物类型是哪三种？ ①原代细胞培养――直接取自动物，没有经过传代。②二倍体成纤维细胞株――从胚胎组织中制备，保留了胚胎细胞的快速、重复分裂的能力。常用于病毒疫苗的生产。③连续细胞系――最早来源于恶性肿瘤细胞，具有快速生长的能力，不会衰老，迅速分裂，营养要求简单。19、什么是细胞病变效应？可见的病毒对感染细胞的影响为细胞病变效应（CPE）。20、什么是病毒多角体？多数昆虫病毒在宿主细胞内形成的光镜下呈多角形的包涵体，称为病毒多角体。21、比较NPV和CPV。NPV是核型多角体病毒，是一类在昆虫细胞核内增殖的、具有蛋白质包涵体的杆状病毒。CPV是质型多角体病毒，是一类在昆虫细胞质内增殖的、具有蛋白质包涵体的球状病毒。22、比较病毒、类病毒、拟病毒和朊病毒。病毒是一种含有RNA或DNA的遗传因子，核酸外被蛋白质，能在细胞中复制，但是具有特征性的细胞外形式。类病毒的细胞外形式是裸露的RNA，没有蛋白质衣壳。RNA分子不含编码蛋白质的基因，其复制完全依赖宿主的功能。通过影响宿 32主细胞的mRNA加工过程而使宿主致病。拟病毒又称类类病毒、壳内病毒或病毒卫星，是一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒，仅由裸露的RNA或DNA组成。拟病毒的复制必须依赖辅助病毒的协助。拟病毒也可干扰辅助病毒的复制减轻其对宿主的损害。朊病毒又称蛋白侵染因子，是一类不含核酸的传染性蛋白质分子，因能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相似的构象变化，从而使宿主致病。23、比较拟病毒、卫星病毒和卫星RNA。拟病毒又称类类病毒、壳内病毒或病毒卫星，是一类包裹在真病毒粒中的有缺陷的类病毒，仅由裸露的RNA或DNA组成。拟病毒的复制必须依赖辅助病毒的协助。拟病毒也可干扰辅助病毒的复制减轻其对宿主的损害。卫星病毒是一类基因缺损，必须依赖某形态较大的专一辅助病毒才能复制和表达的小型伴生病毒。无独立感染能力所含信息仅够编码自身衣壳蛋白。侵染宿主细胞的起始阶段不必依赖辅助病毒，若有则卫星病毒可复制、转录和翻译产生染力的子代卫星病毒；若无则卫星病毒只能整合到宿主基因组上，以前病毒形式进入潜伏期。 卫星RNA是一类仅存在于某专一病毒粒的衣壳内，并完全依赖后者才能复制自己的小分子RNA病原因子。多个卫星RNA分子可与辅助病毒基因组存在于同一衣壳中。其复制和包装全部依赖辅助病毒，后者不依赖前者，对辅助病毒侵染宿主不是必要条件。能干扰辅 33助病毒的复制从而降低其增殖量。24、试解释朊病毒是如何致病的。能引起宿主体内现成的同类蛋白质分子发生与其相应的感应性构象变化。25、试比较致癌基因和原癌基因。致癌基因是指能引起宿主细胞无控制分裂的病毒基因。原癌基因是正常基因被病毒控制后像致癌基因一样引起失去控制的细胞分裂。第四章
营养1、试说明微生物利用碳源和氮源的一般规律。在元素水平上最适的碳源是“C.H.O”型。其中的糖类是最广泛利用的碳源，其次是有机酸、醇类和脂质。糖类中，单糖优于双糖和多糖，己糖优于戊糖，葡萄糖、果糖优于甘露糖、半乳糖；多糖中，淀粉优于纤维素或几丁质，同多糖优于杂多糖。微生物对氮源的利用顺序是：“N.C.H.O”或“N.C.H.O.X”类优于“N.H.”类，更优于“N.O”类，最不易被利用的是“N”类。2、举例说明何谓三功能营养物。同时兼有三种营养功能的营养物，碳源、氮源和能源。如氨基酸。3、试举例说明氨基酸自养微生物在实践上的重要性。氨基酸自养型微生物可将人或动物原先无法利用的廉价氮源转化成菌体蛋白或含氮的代谢产物，以丰富人类的营养和扩大食物资源，对于人类生存和发展具有十分重要的意义。344、能否精确地确定微生物对微量元素的需求，为什么？无法精确地确定微生物对微量元素的需求，因为在其它天然成分、一般化学试剂、天然水或玻璃器皿中，微量元素都以杂质状态存在，所以除非特别精密的营养、代谢研究，一般不需专门添加。5、为什么生长因子通常是维生素、嘌呤、嘧啶及氨基酸等，而葡萄糖通常不会作为生长因子？通常生长因子是指微生物生长过程中所必需的，且需要量很小，而微生物自身不能合成或合成量不足以满足机体生长需要的有机化合物。葡萄糖通常作为碳源和能源物质被微生物利用，需要量较大，而且其他一些糖类等碳源物质也可代替葡萄糖满足微生物生长所需。6、试以能源为主，碳源为辅对微生物的营养方式进行分类。试比较它们的异同。依据微生物对能源和碳原的需求将微生物分成下列四种营养类型。①光能无机营养型可利用光能，以CO2作为唯一或主要碳源，以无机物作为供氢体，还原CO2合成细胞有机物质。②光能有机营养型可利用光能，以CO2和简单有机物作为基本碳源，以有机物作为供氢体，还原CO2合成细胞有机物质。 ③化能无机营养型以CO2作为唯一或主要碳源，以氧化无机物释放的化学能为能源，利用无机物作为电子供体还原CO2合成细胞有机物质。④化能有机营养型以有机物为碳源，以氧化有机物产生的化学能为 35能源，利用有机物作为电子供体合成细胞有机物质。7、以大肠杆菌磷酸烯醇式丙酮酸-糖磷酸转移酶系统为例解释基团转位。大肠杆菌通过磷酸转移酶系统，即磷酸烯醇式丙酮酸-己糖磷酸转移酶系统，来完成一些营养物质的运输，具体的运送分以下两步进行。 ①热稳定蛋白（Hpr）的激活。Hpr是一种低分子量的可溶性蛋白，结合在细胞膜上，具有高能磷酸载体的作用。细胞内高能化合物磷酸烯醇式丙酮酸（PEP）的磷酸基团可通过酶Ⅰ的作用把Hpr激活。 ②糖经磷酸化后运入细胞膜内。膜外环境中的糖先与外膜表面的酶Ⅱ结合，再被转运到内膜表面。这时，糖被P-Hpr上的磷酸激活，并通过酶Ⅱ的作用将糖-磷酸释放到细胞内。8、举例说明微生物营养类型的可变性及对环境条件变化的灵活性。 紫色非硫细菌在没有有机物时可同化CO2进行自养生活，有有机物时利用有机物进行异养生活，在光照及厌氧条件下利用光能进行光能营养生活，在黑暗及好氧条件下利用有机物氧化产生的化学能进行化能营养生活。9、何谓选择性培养基？试举例。根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要，或对某种化合物的敏感性不同而设计出来的一类培养基，利用这种培养基可将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来。例如，为检测怀疑导致食物中毒食样中的肉毒梭状芽胞杆菌，可把抗生素磺胺嘧啶和多粘菌素硫酸盐（SPS）加到培养梭菌的厌氧培 36养基中。这种培养基促进肉毒梭状芽胞杆菌的生长但抑制大多数其它梭菌的生长。10、如果要从环境中分离得到能利用苯作碳源和能源的微生物，该如何设计实验？①从苯含量较高的环境中采集土样或水样；②配制培养基，制备平板，一种以苯作唯一碳源（A），另一种不含任何碳源（B）；③将样品适当稀释，涂布平板；④平板置于适应温度下培养，观察有无菌落产生；⑤A平板上的菌落编号转至B平板，相同条件下再培养；⑥挑取A平板上生长，B平板上不生长的菌落，在一个新的A平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用苯作唯一碳源和能源的微生物纯培养物；⑦将该菌株转至以苯作唯一碳源的液体发酵培养基中进行摇瓶发酵试验，利用相应化学方法分析该菌株分解利用苯的情况。11、若要将秸秆变废为宝，简述设计。①利用秸秆制备菌悬液样品；②配制培养基，制平板，一种仅以纤维素作为唯一碳源（A），另一种不含任何碳源（B）；③将样品适当稀释，涂布A平板；④将平板置于适当温度条件下培养，观察是否有菌落产生； ⑤将A平板上的菌落编号并分别转至B平板，置于相同的温度条37件下培养（B平板上生长的菌落是可以利用空气中CO2的自养菌）； ⑥挑取在A平板上生长而不在B平板上生长的菌落，在一个新的A平板上划线、培养，获得单菌落，初步确定为可利用纤维素作为碳源和能源的微生物纯培养物；⑦初步确定的目标菌株转接到以纤维素作为唯一碳源的液体培养基中进行摇瓶发酵试验，利用相应方法分析该菌株产生纤维素酶的情况，利用该菌株进行进行秸秆发酵制成纤维素酶。12、以伊红美蓝为例，分析鉴别培养基的作用原理。鉴别性培养基是在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同的微生物的培养基。例如，伊红美蓝培养基（EMB），可检查在乳品和饮用水中是否存在肠道致病菌，是一种鉴别培养基，含有伊红和美蓝两种染料作为指示剂，大肠肝菌发酵乳糖产酸造成酸性环境时，两染料结合形成复合物，使长出的大肠肝菌菌落呈深紫色并带有金属光泽，而与其它不能发酵乳糖产酸的微生物区分开来。13、利用酪素培养基平板筛选产胞外蛋白酶细菌，在平板上发现有几株菌落周围有蛋白水解圈，能否仅凭蛋白水解圈与菌落直径比的大小，判断该菌株产胞外酶的能力大小？应该怎样做筛选出高产蛋白酶的菌株？不能。因为：38⑴不同微生物的营养需求、最适生长温度等生长条件有差别，在同一平板上相同条件下的生长及生理状况不同；⑵不同微生物所产蛋白酶的性质（如最适催化反应温度、pH、对底物酪素的降解能力等）不同；⑶该学生所采用的是一种定性及初步定量的方法，应进一步针对获得的几株菌分别进行培养基及培养条件优化，并在分析这些菌株所产生蛋白酶性质的基础上利用摇瓶发酵实验确定蛋白酶高产菌株。14、固体培养基有何用途？为微生物的生长提供营养斜面，常用于微生物的分离、纯化、计数等方面的研究，可依据使用的目的的不同制成斜面、平板等。15、半固体培养基在微生物学中的应用有哪些？细菌的动力观察；趋化性研究；厌氧菌的培养、计数等；细菌酵母菌的保藏。 第五章
代谢1、光合作用和呼吸作用是如何关联的？光合作用中，光能被用来还原二氧化碳，形成富含能量的化合物， 39如葡萄糖和其它碳水化合物，在好氧呼吸中，富含能量的化合物被氧化成二氧化碳和水，部分释放的能量被捕获并用于生命活动。2、化能自养和化能异养微生物的主要区别是什么？细菌属于哪一类？引起人类疾病的微生物又属于哪一类？化能自养型以CO2作为唯一或主要碳源，以氧化无机物释放的化学能为能源，利用无机物作为电子供体还原CO2合成细胞有机物质。 化能异养型以有机物为碳源，以氧化有机物产生的化学能为能源，利用有机物作为电子供体合成细胞有机物质。细菌中既有化能自养型，又有化能异养型。几乎所有的传染性微生物都采用化能异氧代谢。3、氧气的存在会终止糖酵解吗？发酵呢？克雷布斯循环呢？电子传递链呢？糖酵解是指微生物开始分解葡萄糖等糖时所采用的代谢途径，糖酵解的产物是丙酮酸。不需要氧气，有氧无氧存在时都能发生。 丙酮酸在缺氧条件下继续发生的代谢称为发酵。有氧存在时，会阻止发酵的进行，这被称为巴斯德效应。克雷布斯循环即三羧酸循环。是在有氧条件下，丙酮酸发生的代谢。电子传递链是传递有氧呼吸时产生的能量的一系列电子载体。可在有氧条件下，最终将氧气还原成水。4、一个葡萄糖分子经过糖酵解实际产生四分子ATP，那为什么我们要说只产生两分子ATP呢？40尽管一个葡萄糖分子经过糖酵解实际产生四分子ATP，但因为由葡萄糖形成6-磷酸葡萄糖以及由6-磷酸果糖形成1，6-二磷酸果糖时会消耗2分子ATP,所以每个葡萄糖分子净生成2分子ATP。5、原核生物中的电子传递链是在哪里发挥作用的？而在真核生物中呢？电子传递链在原核生物的细胞膜上，真核生物的线粒体内膜上。6、什么物质在光合磷酸化循环中重新回到叶绿素，而它在非循环光还原中无法返回？电子。7、地球上的第一种光合生物很可能是何种生物？它们是好氧生物还是厌氧生物？地球上第一种光合生物很可能是紫色和绿色细菌。通常是专性厌氧菌，光合产物不释放氧。8、何种代谢途径是硝化细菌的特征？为什么说它们是重要的生物？ 通过化能自养氧化无机物并从中获取能量是硝化细菌的主要代谢途径。硝化细菌能增加植物可利用的含氮化合物，补偿土壤中植物消耗的氮，所以是重要的生物。9、哪种形式ATP的合成不需要细胞质膜的参与？为什么？底物水平磷酸化是经过特定的酶催化有机物分解产生的ATP，不需要膜的参与。而氧化磷酸化中ATP的产生是以消耗膜内外质子动力为代价的，所以需要膜的参与。4110、比较底物水平磷酸化、氧化磷酸化和光合磷酸化。底物水平磷酸化――ATP经过特定的酶催化有机物分解代谢产生，磷酸基团被加到某种中间产物上，最终将磷酸基团转移到ADP上形成ATP。氧化磷酸化――ATP的产生是以消耗膜内外质子动力为代价的，质子动力的形成与ATP合成的偶联，是通过一种称之为ATP合成酶的膜蛋白完成的。光合磷酸化――发生在光合作用有机体中，机制与氧化磷酸化机制相似，不同的是在光合磷酸化过程中，是光推动了产生质子动力的氧化反应。11、柠檬酸循环和糖酵解一般具有哪两种同样的功能？主要有两个功能：生物产能和生物合成。12、乙炔如何用于固氮研究？利用乙炔还原法测定固氮酶的活力。因为固氮酶可以催化很多反应，其中包括将乙炔还原形成乙烯的反应，通过用气相色谱仪检测出来的这两种气体的量的变化，可反映出样品中固氮酶的活力。 13、比较四种CO2固定途径的关键酶及其特点。4214、什么是厌氧氨氧化反应？无氧条件下氨被氧化的反应。15、乙醛酸循环的重要功能是什么？关键酶是什么？功能：使TCA循环可高效产能，为许多重要生物合成反应提供有关中间代谢物。使丙酮酸和乙酸等化合物源源不断的合成4C二羧酸。 关键酶：异柠檬酸裂合酶以及苹果酸合酶。16、不同营养类型好氧固氮菌的抗氧机制。好氧性自生固氮菌：呼吸保护和构象保护。通过极强的呼吸作用迅速将周围环境中的氧消耗掉，使细胞周围微环境处于低氧状态或高氧条件下，形成一个无固氮活性但能防止氧害的构象。蓝细菌固氮酶：具有异型胞的种类，固氮酶在异型胞内，胞外具厚膜可阻止氧气进入细胞的屏障；胞内缺乏PSⅡ，脱氢酶和氢化酶活性高，使胞内维持很强的还原态；超氧化物歧化酶活性高，可解除氧的毒害；较高的呼吸强度，有利于消耗过多的氧，产生必需的ATP。 无异型胞的种类，可通过时间和空间上的分隔，以及提高酶的活性实现固氮酶的保护。时间上，白天进行光合作用，晚上进行固氮作用；空间上，束状群体中央处于厌氧环境下的细胞失去PSⅡ，对固 43氮酶起到保护作用；过氧化物酶和SOD的活性较高，可以除去有毒的过氧化物，从而保护固氮酶。17、以金黄色葡萄球菌为例，试述其肽聚糖合成的途径。根据反应的部位的不同，可分为在细胞质中合成，在细胞膜上合成以及在细胞膜外合成三个阶段。⑴在细胞质中，由葡萄糖合成N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸，然后，由N-乙酰胞壁酸合成UDP-N-胞壁酸五肽。⑵在细胞膜上，UDP-N-胞壁酸五肽掺入细胞膜并进一步接上N-乙酰葡萄糖胺和甘氨酸五肽桥，该过程必须有细菌萜醇的参与。 ⑶在细胞膜外，已合成的肽聚糖单体插入到细胞膜外的细胞壁生长点处，然后通过转肽酶的转肽作用，最终使前后两条多糖链间形成甘氨酸五肽桥而发生纵向交联，从而形成新的肽聚糖。18、从青霉素抑菌机制的角度分析青霉素为何只抑制代谢旺盛的细菌？青霉素为肽聚糖单体五肽末端的D-丙氨酰-D-丙氨酸的结构类似物，它们两者可以互相竞争转肽酶的活力中心。当转肽酶与青霉素结合后，因前后两个肽聚糖单体间的肽桥无法交联，因而只能合成缺乏正常机械强度的缺损肽聚糖，因此产生了原生质体或球状体之类的细胞壁缺损的细菌，当它们处于不利的环境条件下时，极易裂解死亡。19、微生物调节代谢流的方式主要有哪两类？调节代谢流的方式主要有两种，一是酶合成调节，调节的是酶的合成量，有诱导和阻遏两种机制；另一种是酶活性的调节，调节已有 44酶分子的活性，有激活和抑制两种机制。20、比较循环光合磷酸化和非循环光合磷酸化的区别。循环光合磷酸化和非循环光合磷酸化的区别：① 存在的微生物不同。循环光合磷酸化只存在于一些厌氧光合细菌中，而非循环光合磷酸化普遍存在于各种绿色植物、藻类和蓝细菌中。② 电子传递途径不同。循环光合磷酸化的电子传递属于循环方式，而非循环光合磷酸化属于非循环式的。③ 对氧需求不同。循环光合磷酸化在无氧条件下进行，不产生氧，而非循环光合磷酸化在有氧条件下进行，产生氧。④ 产能和产还原力的方式不同。循环光合磷酸化的产能和产还原力分别进行，而非循环光合磷酸化的产能和产还原力同时进行。⑤ 氢供体不同。循环光合磷酸化的氢供体为H2S等无机物，非循环光合磷酸化的氢供体为H2O。21、微生物进行固氮作用必须满足的条件。ATP的供应、还原力[H]的提供、固氮酶的催化、还原底物N2、镁离子、严格的厌氧环境。 第六章
生长1、大多数专性厌氧菌缺少什么酶？当有氧存在时，它们为什么会死亡？45大多数专性厌氧菌缺少超氧化物歧化酶，一般也无过氧化氢酶。 当有氧存在时，会形成剧毒的超氧化物阴离子自由基，性质极不稳定，化学反应能力极强，在细胞内可破坏各种重要生物大分子和膜结构，使细胞迅速死亡。2、是否存在无菌的等级？为什么？无菌不存在等级之分。无菌就是指材料表面或内部不存在活的生物体。不存在无菌等级。受处理的微生物的死亡率同样符合自然原因导致其数目下降的规律。在一定时间间隔内微生物以一定比例死亡。所谓&无菌&是指样品中找到活菌体的可能性不大于百万分之一。3、消毒剂A的石炭酸系数为0.5，消毒剂B的石炭酸系数为5.0，两者与苯酚相比又如何？石炭酸系数为1.0的消毒剂的效力与苯酚相同，石炭酸系数小于1.0的消毒剂的效力比苯酚小，石炭酸系数大于1.0的消毒剂的效力比苯酚大。所以，消毒剂A的效力比苯酚小，消毒剂B的效力比苯酚大。4、既然细菌能在肥皂上生长，那为什么还要用它来洗涤呢？虽然肥皂并不杀灭微生物，但是它能分解油脂分子，可通过去除脂类和其他有机物，使抗微生物剂能够直达菌体。5、通过纸过滤不能对水灭菌。那么，膜过滤又如何对水进行灭菌呢？ 膜过滤器是有滤孔的薄膜，能截住大于孔径的颗粒。通常是由硝酸纤维素制成，可以制得0.025-25μm的孔径。只要选择合适孔径的 46膜，就可以阻止相应的感染性因子滤过而进入产物，从而达到灭菌效果。6、家用微波炉能用于物品灭菌吗？为什么？家用微波炉不能用于物品的灭菌。因为微波炉的频率是与水分子的能量水平相适应的，液态水能吸收微波能量，然后作为热量释放到周围的介质中。不含水的物品是无法吸收热量的，另外，细菌芽孢几乎不含水分，所以，微波也无法破坏芽孢。7、在水供应短缺的地区，冰块是安全水源吗？低温会降低酶促反应速度，但杀死微生物的数量有限，解冻过程中，冰块中的残余的微生物会不断增长，所以冰块不是安全的水源。8、巴斯德消毒产品是无菌的吗？巴氏消毒法能杀死液态物品中的病原菌，特别是沙门氏杆菌和结核杆菌，但不能彻底灭菌。9、单细胞生长曲线的哪个时期会进行有规律的细胞分裂？ 单细胞生长曲线的对数期会进行有规律的细胞分裂。10、为何细胞会进入停滞期？如何缩短停滞期？原因：新培养基中的种子细胞缺乏分解或催化有关底物的酶、辅酶，或是缺乏充足的中间代谢物。为产生诱导酶或合成有关的中间代谢物，就需要有一段用于适应的时间，即延滞期。方法：采用指数期接种；较大的接种量；培养基的成分与种子培养基的成分尽量接近，且应适当丰富些；作为种子的微生物尽量不要有所损伤，以免因修复损伤而延长延滞期。4711、将平板菌落计数法与细胞数目联系起来的最主要的假设是什么？假定一个菌落是由一个活细胞产生的。12、显微镜直接计数法的局限性是什么？① 不能区分死活细胞；② 一些小的细胞在显微镜下很难看到，有些细胞也可能被丢失；③ 很难获得精确的计算；④ 样品不被染色时，需要相差显微镜；⑤ 对低浓度悬浮液不适用。细菌悬浮液细胞浓度低于106个时，视野中无菌；⑥ 计数前须对运动的细胞固定。13、什么是大平板异常？产生的原因是什么？大平板异常是指对自然样品进行的显微镜计数得到的数目要比任何平板上长出的真实微生物数目多。原因：一个原因是显微镜直接计数法是将死细胞计算在内；另外，不同微生物对能源和条件的要求不同，一种培养基和一些培养条件只能适应与某一类微生物生长。14、恒化器中的微生物和分批培养中的微生物有何区别？恒化器使实验者能独立的控制生长速率和群体密度。通过改变稀释倍数就可以获得在很大范围内变化的生长速率，通过改变培养基中的单一的生长限制因素就可设定细菌的密度。而在分批培养过程中， 48独立控制其中两个关键的生长因素是不可能的，因为分批培养是一个密闭的体系，生长条件会随时间的改变经常发生变化。15、大肠杆菌在复合培养基中的生长温度比在成分已知的培养基中生长温度高，为什么？为了执行正常的功能，细胞质膜必须处于一种流动状态。若低温“冻结”了细胞质膜，则细胞质膜不能正常运输营养物质和产生质子梯度。通过调整细胞膜脂类的组成，使膜中含有较高含量的不饱和脂肪酸，则会使膜在较低温度下也能保持半流动状态。因而，在复合培养基中培养的微生物的最高和最低温度比合成培养基中要高或低。而微生物最适生长温度更接近于最高温而不是最低温。所以，大肠杆菌在复合培养基中的生长温度比在成分已知的培养基中生长温度高。16、嗜冷菌和耐冷菌的区别。嗜冷菌的最适生长温度为15℃或更低，最高生长温度在20℃以下。最低生长温度为0℃或更低。耐冷菌是指能在0℃生长，但最适生长温度为20-40℃的微生物。17、嗜冷菌细胞质膜采用何种分子机制适应寒冷环境？嗜冷菌细胞质膜含有较高含量的不饱和脂肪酸，这些不饱和脂肪酸使膜在低温下也能保持半流动性；有些嗜冷菌的细胞膜中含有多个双键的碳氢化合物，使膜在低温下也能保持半流动状态。18、超嗜热菌古生菌的细胞膜结构如何？超嗜热菌古生菌的细胞膜不含脂肪酸，而是由碳氢组成的五碳重复单位――植烷，通过醚键连接到磷酸甘油上；并且细胞膜形成的是 49磷脂单层膜，这一结构比双层膜更具有热稳定性。19、从以下几方面对比过氧化氢酶、过氧化物歧化酶和过氧化物还原酶：底物、氧化产物、含有这些酶的菌株。 20、从第一次接种到新鲜培养基中开始描述一下细菌群体的生长周期。把一些微生物接入新鲜的培养基时，通常不会立即生长，需要经历一段称为停滞期的时间，这个停滞期一般很短，或根据培养时间和生长条件有时会被延长。然后进入对数生长期，开始阶段细胞数目增加速度很慢，但很快就会以2n的速度增加，在指数期后期细胞数目会爆发性增加。随着培养基中必需的营养物耗尽及微生物产生的一些废物积累在培养基中，达到了一定的抑制水平，所以对数生长停止，细胞群体达到稳定期。稳定期细胞数目没有净增加或净减少，出现一种隐蔽生长的现象。如果达到稳定期后仍继续培养，这些细胞或许仍能维持生命和继 50续进行代谢，但它们也可能死亡。若出现死亡，可认为细胞处于衰亡期。尽管死亡期也是对数函数，但许多情况下，细胞的死亡速度远低于细胞对数生长速度。21、描述一种直接和间接的测量微生物生长的方法。要确信你所用的方法与你的定义相符。直接法：显微镜直接计数法。取定量稀释的单细胞培养物悬液放置在血球计数板或细菌计数板上，在显微镜下计数一定体积中的平均细胞数，换算出样品中的细胞数。间接法：平板菌落计数法该法是基于每一个分散的活细胞在适宜的培养基中具有生长繁殖并形成一个菌落的能力，因此，菌落数就是待测样品所含的活菌数。22、简单描述单个细胞在平板上分裂形成可见菌落的过程。以此为背景，描述活菌计数的原理。把浓度适当的小于0.1mL的稀释菌液，用无菌涂棒涂在琼脂平板表面，在培养过程中，每个菌细胞都会经过生长繁殖发育成一个菌落。 假定一个细胞只产生一个菌落，平板上长出的菌落数，就是稀释液中含有的活细胞数，可以据此计算出供测样品中的活细胞数。23、恒化器如何调整细胞的生长速率和细胞数目？通过改变稀释倍数就可以获得在很大范围内变化的生长速率； 通过改变培养基中的单一的生长限制因素就可设定细菌的密度。24、比较一下对微生物培养基进行灭菌和对苹果汁进行巴氏消毒有 51什么不同？对微生物培养基进行灭菌采用的是高压蒸汽灭菌，水在加压的情况下加热，水的沸点随压力升高而升高，蒸汽温度可达到121℃，足以杀死微生物孢子和营养细胞，也能破坏病毒的核酸结构，所以，这种方式灭菌较彻底。对苹果汁进行巴氏消毒并不能彻底灭菌。通常采用62.9℃，维持30min，或71.6℃，维持15s，只能杀死液体食品中的病原菌，尤其是沙门氏菌和结核杆菌。25、为什么在食品灭菌中，电离辐射比紫外线更加有效？主要的原因是紫外线不能穿透固体、不透明体和能吸光的表面，因此仅限于物体的表面消毒。电离辐射是一种高能的电磁辐射，常用的两类电离射线γ射线和χ射线都有较高的能量和穿透力，能有效抑制固体或液体中微生物的生长。26、同为抗菌制剂，抑制剂、致死剂和溶菌剂有何区别？抑制剂――又称抑菌剂，可与核糖体结合，抑制蛋白质合成，但结合不紧密，浓度低时会分开，细菌仍可恢复生长。致死剂――又称杀菌剂，可与靶细胞结合，杀死细菌，结合作用不能通过稀释作用解除。溶菌剂――通过细胞裂解，杀死细菌。通过细胞数目的减少和加入溶菌剂后液体变浑浊可观察到。27、区分杀菌剂、消毒剂、去污剂和防腐剂。杀菌剂――可与靶细胞结合，杀死细菌，结合作用不能通过稀释 52作用解除。可以毁灭各种生命形式的微生物，包括内生孢子。消毒剂――能杀死微生物，但不能有效作用于内生孢子。常用于无机物体。去污剂――可以降低微生物数量至安全水平，但无法完全杀死微生物。防腐剂――可以杀死微生物或抑制其生长，对活体组织无毒。28、什么是选择毒力？能够特异的杀死或抑制病原微生物的生长，而对寄主无负面影响。29、描述磺胺类药物的作用机制。PABA是四氢叶酸的结构组分，人体不含二氢碟酸合成酶、二氢叶酸合成酶及二氢叶酸还原酶，不能利用外界的PABA自行合成四氢叶酸。某些细菌具有二氢碟酸合成酶，可以PABA作生长因子，自行合成四氢叶酸，所以细菌必须由外界提供PABA，方可正常生长。磺胺是对氨基苯甲酸（PABA）的代谢类似物，二者产生竞争性拮抗作用。30、什么是半合成抗生素？对天然抗生素的结构进行改造后的抗生素，称为半合成抗生素。31、什么是生物药物素？一类具有多种生理活性的微生物次生代谢物。32、简述微生物产生抗生素抗性的机制。① 产生一种能使药物失去活性的酶。使抗生素核心结构中的键断裂而丧失活性。53② 把药物作用的靶位加以修饰和改变。使抗生素不再与变更过的靶位结合。③ 形成“救护途径”。通过被药物阻断的代谢途径发生变异，变为仍能合成原来产物的新途径。④ 使药物不能透过细胞膜。把药物改变成易外渗的衍生物；不能进入细胞的衍生物；改变膜的透性以阻止药物的透入。⑤ 通过主动外排系统把进入细胞内的药物泵出细胞外。33、高温对培养基成分的有害影响主要表现在哪四方面？如何防止？有害影响① 形成沉淀物② 破坏营养，提高色泽③ 改变培养基pH值④ 降低培养基浓度防止方法①
特殊加热灭菌法。含糖培养基分别灭菌、低压灭菌、间歇灭菌；含Ca2+和Fe3+的培养基与磷酸盐成分分别灭菌；大规模发酵工业进行连续加压灭菌② 过滤除菌法。利用各种滤器培养液中含不耐热成分，缺点是无法清除液体中的病毒。③ 其他防止沉淀发生的方法。配方中成分按顺序加入；加入EDTA等鳌合剂；气体灭菌剂对个别成分分别灭菌。5434、简述评价化学药物的药效和毒性的指标。最低抑制浓度（MIC）――评定某化学药物药效强弱的指标。在一定条件下，某化学药剂完全抑制特定微生物生长时的最低浓度。 半致死剂量（LD50）――评定某化学药物毒性强弱的指标。在一定条件下，某化学药剂杀死50%试验动物时的剂量。最低致死剂量（MLD）――评定某化学药物毒性强弱的指标。在一定条件下，某化学药剂杀死100%试验动物的最低剂量。35、简述化学抗微生物制剂的作用机理。主要是通过一个或多个能破坏细胞成分的化学反应达到杀灭微生物的目的。作用于蛋白质的反应。蛋白质变性剂通过水解、氧化、与原子或化学基团结合一方面永久改变蛋白质，使其无法恢复达到杀菌效果，另一方面通过可逆性改变蛋白质，使其仍可恢复达到抑菌效果。 影响细胞膜的反应。因为细胞膜中含有蛋白质及脂类，使蛋白质变性的反应及能溶解脂类的反应都会影响细胞膜。表面活性剂能降低表面张力。洗涤剂本身不杀菌，帮助除去脂类和其他有机物，使抗微生物剂能直达菌体。影响细胞其他成分的反应。烷化剂可取代核酸中氨基或羟基上的氢；结晶紫可干扰细胞壁合成；乳酸、丙酸可抑制发酵，阻碍能量代谢。影响病毒的反应。通过破坏病毒的核酸或蛋白质实现。 55第七章
遗传变异1、分别用一句话定义基因型和表型。基因型――某一生物个体所含有的全部遗传因子。表型――某一生物个体所具有的一切外部特征和内在特征的总和。2、当生物的基因性发生变化时，表型是否发生相应变化？为什么？ 当生物的基因性发生变化时，表型不一定发生相应变化。突变总是基因型的改变，但这种改变会不会