bd c6流式细胞仪自带的软件和flowjo cflow哪个好

调校流式细胞仪的运行状况;4.2.1运行去碎片(Unclog)循环;Unclog循环会清除流动室中的碎片;1.从上样针移去样品管,在上样针下面放一张吸水纸;??在Collect面板中,点击Unclog按键;4.2.2运行流动室延长清洗循环(Extende;你可以对流动室进行延长时间的清洗,在流动室延长清;1.在上样针处放置一个装有至少500μl流动室延;注意
调校流式细胞仪的运行状况。
4.2.1 运行去碎片(Unclog)循环 Unclog循环会清除流动室中的碎片。 这样清洗流动室: 1. 从上样针移去样品管,在上样针下面放一张吸水纸或者一个空管子,用来接滴下的液滴。 2. 做以下操作之一: ?? 在Collect面板中,点击Unclog按键。 ?? 从菜单选择Instrument>Run Unclog Cycle.
4.2.2 运行流动室延长清洗循环(Extended Clean) 你可以对流动室进行延长时间的清洗,在流动室延长清洗循环中,流动室会通过从上样针处的样品管进行吸取,而使流动室完全充满清洗液。这一循环会使C6在流动室内充满清洗液的情况下自动关机,这样可以使流动室被清洗液充分浸泡。 这样运行流动室延长清洗循环: 1. 在上样针处放置一个装有至少500 μl流动室延长清洗液的管子。 注意:千万不要没有在上样针处放置装有至少500 μl延长清洗液的管子时,就运行流动室延长清洗循环。 2. 从菜单选择Instrument>Extended clean of flow cell。 3. C6关机后,让流式细胞仪放置至少30分钟(为了更彻底的清洗,可放置更长时间)。 4. 重启计算机,C6会运行一个长液流启动循环,并且CFlow会显示一条信息:Extra startup time needed due to cleaning or improper shutdown,这个长液流启动循环会将清洗液从流动室中排出。 5. 当启动完成后,按平时一样操作C6即可。
每次关闭C6流式细胞仪时,CFlow会自动运行程序净化液流系统中的生物毒性物质。你也可以随时手动运行液流净化循环(Decontamination fluid cycle),完成净化循环需要大约13分钟。 这样手动运行液流净化循环: 1. 在上样针处放置一管水。 2. 从菜单选择Instrument>Run decontamination fluid cycle。C6会从去污液瓶中吸取去污液,然后从鞘液瓶中吸取鞘液,用于液流净化循环。
清洗液流管线 每周至少运行一次清洗循环(Cleaning Cycle),以确保上样针和流动室的清洁。清洗液流循环会从清洗液瓶中吸取清洗液,并让清洗液流经液流系统的液流管线。当液流系统充满清洗液之后,清洗液流循环会用鞘液清洗液流系统,然后做一次反冲(Backflush),完整运行这个循环需要大约5分钟。 这样运行液流清洗循环: 1. 在上样针处放置一管清洗液。 2. 从菜单选择Instrument>Run cleaning fluid cycle。
从C6中排除气泡
如果发生以下任何状况,请为C6排除气泡: ?? 你第一次安装这台C6流式细胞仪。 ?? 这台C6流式细胞仪已经超过2天以上没有被使用过。 ?? 你怀疑操作时不小心让系统中进去气泡了,这可能是由于你检测的样品已经干了,或者鞘液用完了所导致的。 这样从流式细胞仪中排除气泡: 1. 在上样针处放置一管鞘液。 注意:如果你是在初次安装仪器以外的任何时间进行排气泡操作,可以跳过步骤2-3。 2. 从菜单选择Instrument>Run cleaning fluid cycle。 3. 等待清洗循环完成,这需要大约16分钟。 4. 在CFlow控制面板设定运行时间为5分钟,然后点击运行RUN按键,让仪器运行直至自动停止。 注意:当仪器运行时,蠕动泵会发出韵律声响,这是正常的。 5. 再次点击运行RUN按键,等待30秒,然后点击暂停PAUSE按键,让泵停止运行。 6. 重复步骤4-5两次,来从系统中充分排除气泡。
用精确体积测量法校准液流 如果你用Accuri Volumetric Validation Beads(Accuri Part #QA-120)进行校准失败了,你可以重新校准C6流式细胞仪。 注意:只有使用CFlow软件才可以进行体积测量操作。你需要按要求经常进行下列操作,以保证C6一直能够被正确的校准: ?? 至少每两个月更换一次所有的蠕动泵管路(参考4.12章节)。 ?? 以中速(Medium)或者高速(Fast)运行样本。 ?? 当你进行校准操作时,请使用与你进行实验时相同的样本体积/液体高度。 这样校准C6: 1. 在样品管中装上与你进行实验操作时等量体积的鞘液。 注意:使用与你进行实验时相同的管子。 2. 将管子放在上样针处。 3. 在CFlow菜单中选择Instrument>Calibrate fluidics进行校准,校准过程需要大约5分钟。 如果校准失败了,C6会自动恢复到出厂时的校准设置以保证正常操作。然而,记录的体积不会自动优化为新的样本体积。如果需要更精确的测量,请再试一次校准操作。
清空废液桶 每天清空废液桶,或者当CFlow软件提醒时清空,以防止废液溢出和可能存在的生物安全风险。 警告:生物样品具有潜在的危险性和/或造成生命威胁,无论何时接触样品和试剂,请确保严格按照程序进行操作,在操作时,请确认已做好恰当的保护,比如穿实验服以及佩戴手套等。 这样清空废液桶: 1. 净化液流(参考4.3章节) 2. 从废液桶顶端断开快速连接废液管线(Quick connect waste line)。
图4-1.断开废液桶管线
3. 移去废液桶盖子。 4. 按照当地的实验室要求弃去废液。 5. 向废液桶中加入大约100 ml 0.5%的NaOCl溶液。 6. 将盖子盖好。 7. 将废液桶管线重新连接到废液桶上。
填充溶液 在启动流式细胞仪之前,检查确认所有的溶液瓶完好,按照所需分别填充鞘液,去污液和清洗液。 注意:C6流式细胞仪采用的是非压力系统,如果需要,您可以在C6运行时打开任何一个溶液瓶,而不会影响仪器的正常工作。 注意:如果溶液瓶需要查看,或者某个溶液瓶的液面检测器没有正确的连接,CFlow会显示提示信息。
4.9 更换溶液瓶内滤器 每一个鞘液瓶、清洗液瓶以及去污液瓶内都有一个环形滤器,BD Accuri推荐每两个月更换一次这些滤器(Accuri Part #CP-132)。在操作时,请确认已做好恰当的保护,比如穿实验服,佩戴手套以及防护镜等。 这样更换溶液瓶内滤器: 1. 净化液流(参考4.3章节)。 2. 从每个瓶子的顶端断开快速连接管线(quick connect lines)。 3. 小心的移去每个瓶子的盖子。 4. 从溶液管的末端断开滤器锁扣,按处理废弃样本一样安全的丢弃旧的滤器。 5. 选择正确的配件进行滤器更换: ?? 鞘液瓶――大的环形滤器 ?? 清洗液和去污液瓶――小的环形滤器 6. 装好各溶液瓶,连上各自的快速连接管线。
检查液流管线
7. 在上样针放置一管去离子水,运行1分钟。 BD Accuri推荐定期检查流式细胞仪的液流管线,确保没有溶液泄露。 这样检查液流管线:
1.净化液流(参考4.3章)。 2.关闭流式细胞仪。 3.打开机器顶盖。 4.仔细检查每个金属锁扣连接处附近的液体小池,确认是否有溶液泄漏。 5.仔细检查每个液流系统的金属托盘,观察是否有固体残余物或者褪色情况。 6.如果发现任何泄露,请立即联系BD Accuri的技术支持人员,不要尝试自己修理仪器。 注意:任何从红色或者透明管线中流出的液体都应该认为是具有生物危险性的,请不要尝试在不戴手套和采取其他防护措施的情况下进行接触和清理,如果清洗工具被污染了,请丢弃。
更换内置鞘液滤器 BD Accrui推荐每两个月更换一次内置鞘液滤器(In-line sheath filter,Accuri Part#CP-138)。如果这台C6每天都会用几个小时,那么BD Accuri推荐每个月更换一次内置鞘液滤器。在操作时,请确认已做好恰当的保护,比如穿实验服,佩戴手套以及防护镜等。 这样更换内置鞘液滤器: 1. 净化液流(参考4.3章)。 2. 关闭C6流式细胞仪,并拔下电源插头。 3. 轻轻打开流式细胞仪的盖子。 4. 旋转内置鞘液滤器的金属锁扣,直至拧开锁扣。 5. 弃去旧的滤器。 内置鞘液滤器
6. 安装新的内置鞘液滤器(Accuri Part #CP-138),这个滤器的两端是不同的,以确保安装方向的正确。 7. 重新将滤器的金属锁扣锁好。 8. 轻轻盖上流式细胞仪的盖子。 9. 在上样针处放置一管鞘液。 10. 插上电源插头,启动流式细胞仪。 11. 排除仪器中的气泡(参考4.5章)。
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 技术参数 BD FACSCalibur 488nm 激光器 (激发 3 荧光通 道) 640nm 激光器 (激发 1 荧光通 道) BD Accuri C6 488nm 激光器 (激发 3 荧光通 道) 640nm...  0.5ml PBS/管,混匀,上机检测(可选择 BD FACSCanto II 或 BD Accuri C6)...运行样本并记录数据 1 将样品管安装到流式细胞仪中并点击 Aquire Data(获取...  BD Accuri C6 日常开关机操作规范_基础医学_医药卫生_专业资料。BD Accuri C6 日常开、关机操作规范开机流程: 1. 检查各液流瓶液面高度,确保可以维持仪 器正常...  Accuri C6软件介绍 22页 1下载券 LS_DYNA用户使用手册(上... 78页 1下载券...至少要保存在本电脑的硬盘的不 在操作系统安装盘的另外盘上, 在操作系统安装盘...  Epics XL与Accuri C6 产品对比表_生物学_自然科学_专业资料。Epics XL 与 ...优秀产品经理指南 微信红包为何这么红? 能让UI设计显得更简约的... 要让产品有...生物秀人才网[]
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从刚研究生入学的2011年底,从吉泰公司接手实验室的ACCURI C6(当时ACCURI公司还没有被BD公司收购,在中国的代理商是吉泰生物),到现在2016年,我快从实验室博士毕业,5年的时间转眼就过去了。这五年时间我一直负责实验室各项流式实验系统的搭建以及的维护,可以说对ACCURI C6这个机器算是相当熟悉了,ACCURI的2个外国主管就曾经来过我们实验室找我们了解使用情况和优缺点。下面就聊一聊我自己对这款流式的一些心得和维护的经验,希望能对大家有所帮助。
我自己最初接触的是BD Calibur检测和BD ARIA II分选,后面轮转并且定组在现在的实验室,才开始使用和负责C6。老板看重的是C6的小巧、性价比以及易维护性易使用性。下面我一个个来分析:
1. C6的小巧在2011年确实值得称道,不过放在2016年,就不是最优势的了。millipore和beckman的小流式都可以做的整合性更好。C6的机器设置有个很莫名其妙的地方,整个液流和激光系统都在机箱的右侧,左侧是一个完全空着的塑料桶,同时鞘液桶、清洗液桶、消毒液桶、废液桶通过一个托盘放在机器的机箱外面。非常不能理解为什么不能像calibur那样把这几个筒放在左侧塑料筒里。
2. 性价比,这个确实没话说,价格我不能说,但是相对于其他家的流式,真的是便宜,我听BD的工程师说有的公司针对大客户曾经做过买一大批试剂送C6的活动。但是C6的维护并不便宜。按照官方使用说明,C6每2个月需要更换一套管路,包括2根蠕动泵橡胶管、清洗液过滤膜、消毒液过滤膜、鞘液过滤膜还有一个管状过滤器,根据实验室秘书的话,这一套1800RMB左右。我自己的使用经验是如果读的样品数目不多(每天小于50个样品),那么可以坚持3-4个月,不过到后面,pumping time会比较久。
3. 关于性价比,除了机器的维护,还有一个很重要的因素是耗材的消耗,因为C6是使用蠕动泵直接从进样针吸样品,而不是像Calibur和AriaII的气压式,所以直接把样品放在EP管就可以上样了,不需要使用BD Falcon的FACS管,这节省的费用对我们这种大规模筛选的实验室简直逆天了。
4. 易维护性和易使用性。容易使用是真的,像我们实验室主要用C6做一个细胞系的筛药,我设置好模版以后,其他人完全只需要打开模版直接使用就行了。因为C6是固体激光器,激光非常稳定,完全不需要调节各个通道的电压(其实也调不了就是了……)和补偿,因为C6的处理器性能强大,没有Calibur的每秒event不能超过3000个的限制,所以读取速度非常快,而且因为是蠕动泵吸样,没有上样后被外管吸走的部分,所以哪怕50ul的样品体积都足够读取数据。
5. 而易维护性这个特点,我不大苟同。第一,管路容易污染,我们实验室所有流式的相关试剂都是milliQ水配置,每天关机前用次氯酸钠和水冲洗2min后再关机,每2天更换一次放在进样针上的水,仍然容易出现开机后读水,每秒200个event的现象,只能跑个decontamination cycle,并且换一管水。我们研究所有一组的C6就因为流动室污染而换了整个流动室。第二,管路容易堵,进样针和内部阀门这两个地方特别容易堵,具体的处理方法我后面会详细写。
下面是我自己整理出来的ACCURI C6使用过程中的各种问题~因为节省耗材,容易使用的优点实在太给力了,所以我着重讲缺点,供大家参考。
1. Cflow Plus是用JAVA写的,一打开直接就占用500M内存,对于老电脑不友好,建议内存最少2G。
2. Cflow Plus在纵向分辨率小于900像素的电脑上打开显示存在问题,不能显示样品名称(可通过在analysis查看每孔名称),也点击不到compensasion的按键(通过自动隐藏windows任务栏可以实现点击),常见的笔记本多是的,就存在这个问题,建议显示器最小也要有或者。
3. 如果在点击run后,到analysis之前有个pumping time,这个时间段如果点击到非collect的column(例如analysis或者statistics)就会出现bug,无法切换回collect,如果没有设置读取样品的limit,机器会一直run,但是没办法停止。这个bug非常要命。
4. 如果设置补偿后保存文件,再打开文件,空白孔的补偿会归零,需要重新设置补偿并apply到所有孔上。
5. 导出为第三方流式文件格式后用flowjo打开,每个通道会有两个名字,一个是原始的,一个是补偿过的,看起来太累赘。
1. c6的模板都是96孔板的格式,建议可以自己设置板子的形状格式,例如我一个细胞有15个处理组,就需要一行有15个孔,而默认的12*8的就不适合。
2. CFLOW PLUS的分析及制图功能强大一些,现状是初步筛选用c6检测一下表形,最后出figure的数据还是用平台的LSR或者Fortessa的数据导出到FLOWJO里面做图。
3. 针对机器的维护设置一个类似批处理的功能,例如可以设置一个“维护并关机”的批处理,可以在做完decontamination cycle后自动开始cleaning cycle,完成两个后自动跑水2min后关机,这样能极大的减少维护人员的工作量。
1. 有的时候细胞体积过大或者某个通道的亮度太大,会导致数据溢出了,全跑到坐标系的轴上了,希望能提供内置的ND滤镜切换功能,这样在强度太大的时候可以选择apply上ND滤镜,降低光线的波长。摄影上的ND滤镜技术已经非常成熟,价格也可以接受。
2. 管路容易老化,我们实验室一个月平均20000个流式样品,一个半月鞘液和废液蠕动泵的橡皮管就会老化。
3. 内部管路可能过于精细,如果读的贴壁细胞或者PI比较多,非常容易在内部堵住,通过常规的更换管路和滤膜是无法处理的,需要请BD工程师拆机清理内部三通阀,这里补充一个自己应急的解决方法,仅供工程师来不及维修的时候使用:吸1ml 胰酶在EP管里面,然后选择instrument页面的extend cleaning选项,机器会把胰酶洗到所有管路中,然后放室温2-3h再开机,开完机以后长按开机键强制关机,等待一会再开机,因为强制关机后仪器会自动清理阀门,这样有可能冲开细胞黏住的阀门。。
4. 读取贴壁细胞较多的时候进样针容易堵住,目前我个人在实验室指定的规则是读完样品后要跑水2min,关机前先后跑次氯酸钠和水 2min,所有buffer和鞘液都使用双蒸水。如果发生堵塞,拆下进样针,使用注射器和10ul小枪头,将进样针冲洗几次,然后将进样针和10ml左右的胰酶置于15ml离心管,37度摇床过夜(就是质粒小摇的那种摇床)
5. 前后样品间存在一部分串联污染。我们实验室使用C6读取悬浮细胞,一个样品大约2000个活细胞数即可,如果前一个样品存活率很高,密度也大,而下一个样品细胞密度很低,则在读取第二个样本的时候会发生第一个样品残留了一点的细胞混入第二个数据中,并且因为前者细胞密度大,绝对计数多,从而对第二个样本的结果产生影响。目前我个人采取的措施是遇到第一个样本细胞浓度远大于第二个样本时,读取第二个样本的前20ul的event抛弃掉,读取时看到体积到了20ul点delete events.
6. 由于没有FL2-W通道,不是很适合做PI染色的细胞周期实验。虽然可以通过GATE FL2-A和FL2-H下的对角线上的细胞去除粘黏体细胞,但是效果远不如使用FL2-W和FL2-H的gate方法好,当时和BD工程师讨论过,同样的样品在Calibur和C6上的细胞周期结果,Calibur的分辨率远胜过C6。
7. C6流动室污染不容易处理,我们实验室没发生污染,但是别的组已经有需要更换流动室的事情发生,成本太高。
没想到一写就写了这么多东西,正是爱之深恨之切,我的C6流式文件大小已经超过20G,可以说C6真的是伴随着我的各项科研成果,也正是这样的熟悉了解才让我对C6了若指掌。如果您看到我上面列出的这些缺点而对C6有些顾虑,那真的太抱歉了,C6的优点实在是太给力了,以至于我一句话就带过了,节省耗材这一项就可以给我们实验室节省十几万的FACS管费用,而容易上手的特性,也让实验室的新人们能很快上手实验室的筛选系统,而不用太纠结于流式使用方法的学习。
总结一下,C6经典的两激光四通道设置、超级稳定的固态激光器、超快的读取速度和易使用性,使得C6成为非常适合悬浮细胞筛选药物,或者野外环境检测CD4、CD8这种成熟血细胞实验盒的流式细胞仪。如果实验室贴壁细胞样品多,细胞周期实验做的比较多,或者对出figure的效果有较高要求的,还是不要用C6了~我们自己的实验室就是用C6进行药物或者基因的筛选,但是对小鼠的免疫系统的细胞类群鉴定这种高要求的实验还是去平台的LSR、Aria II或者Fortessa做。上面提到的C6的优点和缺点我也和BD工程师还有产品专员还有accuri的主管反映过,他们承诺会针对提出来的缺点和建议做出改进~希望能够实现吧~
絮絮叨叨写了这么多,希望对大家能有所帮助。
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本帖最后由 家的感觉 于
15:29 编辑
谢谢你详细的总结,感觉挺好,看来C6不适合检测细胞周期啊,但Aria的对于核酸染料是不是很容易堵塞管路?工程师是说不让用Aria做核酸染料的实验,你对于此有何看法,谢谢~~
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签到天数: 1 天[LV.1]初来乍到
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非常感谢您的分享和总结!我现在正在使用C6,文中您说的: 针对机器的维护设置一个类似批处理的功能,例如可以设置一个“维护并关机”的批处理,请问具体怎么设置啊?我翻了了一下C6自带的软件的菜单都没找到关于这个的设置,可以请您详细说明一下吗?
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逛了这许久,何不进去瞧瞧?关注今日:49 | 主题:524377
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【求助】BD Accuri C6 流式细胞仪 测ROS
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这个帖子发布于2年零329天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
刚接触流式细胞仪,要测细胞内ROS。工程师给了此型流式细胞仪做ROS的图形。
前几天自己做预试,不会设门,不会划分界线,跑了两管,我用的是细胞株。出来的阴性对照组图如下:
请忽略我划得十字门,请问应该如何设门?是右下象限那部分细胞么?其他参数应该怎么设置?需要划出阴阳分界线么?如果划是在阴性组小峰的右侧划么?直方图的横坐标是FL-1 A 还是FL-1 H?结果应该用百分比还是平均荧光强度表示?我的结果里怎么没有几何平均强度这一项呢?看文献似乎用平均荧光强度来表示,数值大约是几百,为什么我这么设置后,mean FL-1A
是几万呢?
请大家赐教!多谢!
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楚庄王 编辑于
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同学,你的问题解决了没有呢?我实验室也是C6流式细胞仪,也刚巧做细胞内ROS。跟你遇到了同样的问题。上图,B1是我的阴性对照(无探针),B2是对照未处理细胞+探针。出来的图,峰值是在10`6的位置了,一开始以为做错了,结果重复后发现还是这样。艾玛,这个mean值这么高,能用不?文献中的数据和图都是在10·2左右啊,我都快急死了~~希望能够多交流~~
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很急! 请熟悉的朋友们指导!
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你好,最近也在测ros,但是有一个问题,药物刺激和试剂盒的阳性刺激不知道怎么加,是同时加,还是按不同时间加入!我的药物刺激是六小时的,而阳性刺激,说明书上说是半个小时刺激后出现峰值!我怕同时加入,测不到阳性对照的峰值!求解答 :
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阳性后加就行。
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请问你知道流式细胞仪测ROS时怎么设置相应的参数么?
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同学,你的问题解决了没有呢?我实验室也是C6流式细胞仪,也刚巧做细胞内ROS。跟你遇到了同样的问题。上图,B1是我的阴性对照(无探针),B2是对照未处理细胞+探针。出来的图,峰值是在10`6的位置了,一开始以为做错了,结果重复后发现还是这样。艾玛,这个mean值这么高,能用不?文献中的数据和图都是在10·2左右啊,我都快急死了~~希望能够多交流~~
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这些天为了这台Accuri C6 的使用,弄得焦头烂额的,我的数据和你差不多,平均荧光强度都是几万。刚才又和工程师又联系了, 工程师说每种型号的仪器所出来的MEAN值都不同,没有可比性,这型号的仪器就是这样的,横坐标到10的7.2次方; 而其他的仪器只到10的四次方,让我放心比就好了。
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你好!看到你的回复我就放心了。还想请教你个问题。结果出来之后,我们是用哪个数据啊?是应该用“This plot”的mean ?还是图中V3-R的mean?另外,怎样进行统计学分析啊?是 实验组/对照组 的比值? 还是直接用mean值?
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应该是V3的
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看了园子里的帖子,应该用平均荧光强度来统计。
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多谢!多谢!
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楚庄王 这些天为了这台Accuri C6 的使用,弄得焦头烂额的,我的数据和你差不多,平均荧光强度都是几万。刚才又和工程师又联系了, 工程师说每种型号的仪器所出来的MEAN值都不同,没有可比性,这型号的仪器就是这样的,横坐标到10的7.2次方; 而其他的仪器只到10的四次方,让我放心比就好了。C6这个机器的PMT电压不能调,其他流式的电压都是可调节的。这个工程师真是大言不惭。
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楼上正解,C6的电压是固定值,所以可能出来得荧光值很大。所以你用相对平均荧光强度即可。实在有强迫症的,网上有教程如何利用FLOWJO去处理C6出来的数据,貌似可以调数据。
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clockchong 同学,你的问题解决了没有呢?我实验室也是C6流式细胞仪,也刚巧做细胞内ROS。跟你遇到了同样的问题。上图,B1是我的阴性对照(无探针),B2是对照未处理细胞+探针。出来的图,峰值是在10`6的位置了,一开始以为做错了,结果重复后发现还是这样。艾玛,这个mean值这么高,能用不?文献中的数据和图都是在10·2左右啊,我都快急死了~~希望能够多交流~~同学,我也遇到同样的问题,我的荧光强度也很好同时问一下同学,你做的什么细胞?阈值设定为多少?
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clockchong 同学,你的问题解决了没有呢?我实验室也是C6流式细胞仪,也刚巧做细胞内ROS。跟你遇到了同样的问题。上图,B1是我的阴性对照(无探针),B2是对照未处理细胞+探针。出来的图,峰值是在10`6的位置了,一开始以为做错了,结果重复后发现还是这样。艾玛,这个mean值这么高,能用不?文献中的数据和图都是在10·2左右啊,我都快急死了~~希望能够多交流~~同学,你的问题解决了没?想向你请教ros数据处理的问题
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楚庄王 看了园子里的帖子,应该用平均荧光强度来统计。
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你说的平均值是这组吗?是选FL1-A通道吗?
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lmlxy0518 楼上正解,C6的电压是固定值,所以可能出来得荧光值很大。所以你用相对平均荧光强度即可。实在有强迫症的,网上有教程如何利用FLOWJO去处理C6出来的数据,貌似可以调数据。你好,最近在用C6做流式,也是阴性对照组在10^3,不能调节电压。请问相对平均荧光强度如何计算?以及平均荧光强度是指mean V3-R还是“this plot”的mean值?这些表格里的mean 值都是六七位数了,我看别人的都是100,200的,是怎么处理的呢
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wyyr逸清辉 你好,最近在用C6做流式,也是阴性对照组在10^3,不能调节电压。请问相对平均荧光强度如何计算?以及平均荧光强度是指mean V3-R还是“this plot”的mean值?这些表格里的mean 值都是六七位数了,我看别人的都是100,200的,是怎么处理的呢你好,我是第一次用BD Accuri C6 流式测ROS,仪器不太会用,请问仪器怎么选择光路通道什么的?
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楚庄王 这些天为了这台Accuri C6 的使用,弄得焦头烂额的,我的数据和你差不多,平均荧光强度都是几万。刚才又和工程师又联系了, 工程师说每种型号的仪器所出来的MEAN值都不同,没有可比性,这型号的仪器就是这样的,横坐标到10的7.2次方; 而其他的仪器只到10的四次方,让我放心比就好了。你好同学,我用的也是BD C6做的ROS,横坐标起始就有10*3这么大,mean值特别大,请问最后要怎么统计数据?十万火急,望赐教!
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wyyr逸清辉 你好同学,我用的也是BD C6做的ROS,横坐标起始就有10*3这么大,mean值特别大,请问最后要怎么统计数据?十万火急,望赐教!
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你好同学,我刚接触C6,之前测ROS我们用的是荧光分光光度计,现在有些具体问题不明白想交流一下,可以吗?
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