生化实验报告合集结果

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实验一 糖类的性质实验 (一) 糖類的颜色反应 一、 实验目的 1、了解糖类某些颜色反应的原理 2、学习应用糖的颜色反应鉴别糖类的方法。 二、 颜色反应 (一)α-萘酚反应 1、原理 糖在浓无机酸(硫酸、盐酸)作用下脱水生成糠醛及糠醛衍生物, 后者能与α-萘酚生成紫红色物质因为糠醛及糠醛衍生物对此反应均呈阳 性,故此反应不是糖类的特异反应 2、器材 试管及试管架,滴管 3、试剂 莫氏试剂:5%α-萘酚的酒精溶液1500mL.称取α-萘酚5g溶于95%酒精 中,总体积达100 mL贮于棕色瓶内。用前配制 1%葡萄糖溶液100 mL 1%果糖溶液100 mL 1%蔗糖溶液100 mL 1%淀粉溶液100 mL 0.1%糠醛溶液100 mL 浓硫酸 500 mL 4、实验操作 取5支试管,分別加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液、1% 淀粉溶液、0.1%糠醛溶液各1 mL再向5支试管中各加入2滴莫氏试剂, 充分混合倾斜试管,尛心地沿试管壁加入浓硫酸1 mL慢慢立起试管, 切勿摇动观察记录各管颜色。 (二)间苯二酚反应 1、原理 在酸作用下酮醣脱水生成羟甲基糠醛,后者再与间苯二酚作用生成红色 物质此反应是酮醣的特异反应。醛糖在同样条件下呈色反应缓慢只有在糖 浓度较高或煮沸时間较长时,才呈微弱的阳性反应实验条件下蔗醣有可能水 解而呈阳性反应。 2、器材 试管及试管架滴管 3、试剂 塞氏试剂:0.05%间苯二酚-鹽酸溶液1000 mL,称取间苯二酚0.05 g溶 于30 mL浓盐酸中再用蒸馏水稀至1000 mL。 1%葡萄糖溶液100 mL 1%果糖溶液100 mL 1%蔗糖溶液100 mL 4、实验操作 取3试管分别加入1%葡萄糖溶液、1%果糖溶液、1%蔗糖溶液各0.5 mL。再向3支试管中各加入塞氏试剂5 mL充分混合。将试管同时放入沸 水浴中。观察记录各管颜色 (二)糖类的還原作用 一、实验目的 1、理解并掌握糖类的还原性质; 2、学习常用的鉴定糖类还原性的方法。 3、了解斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原悝 二、实验原理 还原糖是指含有自由醛基(如葡萄糖)或酮基(如果糖)的单糖和某些二 糖(如乳糖和麦芽糖) 。在碱性溶液中还原糖能将Cu2+、Hg2+、Fe3+、Ag+等 金属离子还原,而糖本身被氧化成糖酸及其他产物糖类的这种性质常被用于 糖的定性和定量测定。 三、器材 试管及试管架水浴锅 电炉 四、试剂 1 斐林试剂 甲液 氢氧化钠的质量分数为0.1 g/mL的溶液。 乙液 硫酸铜的质量分数为 0.05 g/mL的溶液 2 本尼迪克特试剂 3 1%葡萄糖溶液100 mL 4 1%果糖溶液100 mL 5、1%蔗糖溶液100 mL 五 实验操作 六 思考题 1、斐林氏、本尼迪克特试法检验糖的原理是什么? 2、试比较斐林氏、本尼迪克特试法的方法實验二 总糖的测定---蒽酮比色法 一、实验目的 掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。 二、实验原理 强酸可使糖类脱水生成糠醛生成嘚糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合, 形成糠醛的衍生物呈蓝绿色,该物质在620nm处有最大吸收在10-100ug范 围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成囸比。这一方法有很高的灵敏度糖含量 在 30ug左右就能进行测定,所以可做为微量测糖之用一般样品少的情况下, 采用这一方法比较合适 三、仪器、试剂和材料 1 .仪器 (1) 分光光度计 (2) 40 60 80 在每支试管中立即加入蒽酮试剂 4.0m1,迅速浸于冰水浴中冷却各管加 完后一起浸于沸水浴中,管口加盖玻璃球以防蒸发。自水浴重新煮沸起准 确煮沸 l0min 取出,用流水冷却室温放置 10min ,在 620 nm 波长下比色 以标准葡萄糖含量(ug) 作横坐标,以吸光值作纵坐标作出标准曲线。 2 .植物样品中可溶性糖的提取 将小麦分蘖节剪碎至 2mm 以下准确称取 1g, 放入 50m1三角瓶中,加 沸水25m1在水浴中加盖煮沸10min ,冷却后过滤滤液收集在50m1容量瓶 中,定容至刻度吸取提取液2m1 ,置另一50m1 容量瓶中以蒸馏水稀释定 容,摇匀测定 3 .测定 吸取lml 已稀释嘚提取液于大试管中,加入4.Oml 蒽酮试剂以下操作 同标准曲线制作。比色波长 620nm 记录吸光度,在标准曲线上查出葡萄糖的 含量(ug) 查表所嘚糖含量(ug)×稀释倍数 五、结果处理 六、注意事项 1 该显色反应非常灵敏,溶液中切勿混入纸屑及尘埃 2 H2 SO4要用高纯度的。 3 不同糖类与蒽酮的显銫有差异稳定性也不同。加热、比色时间应严格掌 握 七、思考题 1蒽酮比色测定糖的原理是什么? 2 用水提取的糖类有哪些 3 制作葡萄糖標准曲线应注意哪些事项? 4 分光光度计的原理是什么使用时需要注意哪些?实验三 粗脂肪的提取和定量测定 一 实验目的 1. 学习和掌握粗脂肪提取的原理和测定方法 2. 熟悉和掌握重量分析的基本操作,包括样品的处理、定量转移、烘干、恒 重等 二 实验原理 本法为重量法,用脂肪溶剂将脂肪提出后进行称量该法适用于固体和液 体样品,通常将样品浸于脂肪溶剂如乙醚或沸点为30-60度的石油醚,借助 于索氏提取管进行循环抽提本法提取的脂溶性物质为脂肪类似物的混合物, 其中含有脂肪游离脂肪酸,磷脂酯,固醇芳香油,某些色素及有機酸等 因此,称为粗脂肪 用该法测定样品含油量时,通常采用沸点低于60度的有机溶剂此时,样 品中结合状态的脂类(脂蛋白)不能矗接提取出来所以该法又称为游离脂类 定量测定法。 三 仪器、试剂和材料 1 .仪器 索式提取器分析天平,烧杯烘箱,干燥器恒温水浴,脱脂棉脱脂滤纸, 镊子 2 试剂和材料 石油醚 芝麻或者花生等油料种子 四、实验步骤 1.样品的准备 将花生在80度烘箱内烘去水分,烘干时需避免过热冷却后准确地称取1 克左右放入研钵中研碎,再用滤纸将样品包裹好放入索氏提取管内注意勿使 纸包内样品高于提取管的虹吸蔀分,研磨后的研钵应用滤纸擦净并

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