一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法
专利名称一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法
技术领域本发明涉及医药发明领域，具体涉及一种仙灵骨葆复方的提取物及其制备方法。
背景技术骨质疏松症是单位体积内骨组织总量即骨量的绝对减少，使得骨的结构改变和功能发生变化，从而出现周围骨骼疼痛，体态变形等症状且易发生骨折的病变。骨质疏松症是一种十分严重，而且可能致命的疾病，目前世界患此病的人数约达数亿，这种病到了晚期骨组织会变得异常脆弱，哪怕是咳嗽一下或在床上翻身都有可能发生骨折。据美国骨质疏松症基金会估计，女性患者最终因骨髋关节骨折而致死的达2%，其治疗费用也是相当高，仅在美国，一年所花的医药费就达7-10万亿美元，随着老龄化社会的到来，原发性骨质疏松症的发病率明显上升，骨质疏松症骨折成为临床常见的损伤性疾病，极易造成骨延迟愈合和不愈合而致残。其发病原因一般认为与钙或营养缺乏，内分泌功能紊乱以及运动不足等因素有关，国内外学者虽提出许多治疗方案，但是迄今为止仍未获得十分有效的治疗措施。中医认为“肾为先天之本”、“主骨生髓”，肾气虚则筋骨隆盛，肾气衰则骨枯而髓减。《素问上古通天论》更直接描述男八女七为基数年龄递增而肾虚症状加重的正相关系，
提出“女子七七，天癸竭而形坏，男子七八，天癸竭......肾脏衰而形体皆极”。说明骨的生
长、发育、强劲衰弱与肾精盛衰有直接密切关系，肾精亏虚则骨髓生化无源，骨失濡养而痿弱无力。现代医学研究证实肾虚患者的下丘脑-垂体-性腺轴功能减退，致成骨功能下降， 单位体积骨组织减少而致骨质疏松。与体内内分泌系统功能紊乱、免疫功能地下及体内微量元素改变有直接关系，原发性骨质疏松包括绝经后骨质疏松和老年性骨质疏松症，绝经后骨质疏松主要是由于雌激素缺乏，破骨细胞的骨吸收功能亢进，属高代谢转换型骨质疏松。而老年性骨质疏松主要是由于成骨细胞老化，功能不全所致，属低代谢转换型骨质疏松症。临床上均有不同程度的肾虚现象，其骨密度均明显低下，所以有就“肾虚证骨密度均为低下”的说法。今年研究证实，补肾中药可通过性激素样作用，增强成骨细胞活性及调节机体骨环境和微量元素的平衡，促进矿物质在骨中的沉积而发挥抗骨质疏松，促进骨痂生长作用， 故临床上多选用入肾经之品为内服之首选。中药仙灵骨葆是由淫羊藿、续断、丹参、知母、补骨脂、地黄等六味中药组成的复方制剂，用于治疗肝肾不足、瘀血阻络所致的骨质疏松症，适于补肾壮骨，具有增加成骨细胞活动，促进成骨细胞再生，又可通过保护性腺组织而维持性激素水平，药理实验证实，服用该药可使整体骨量、骨矿物质含量增加，使得骨钙和骨有机质的构成比向正常水平接近，从而更好地调节机体的代谢紊乱、逆转高骨转换状态，达到对骨质疏松症引起的骨折的治疗目的。目前仙灵骨葆上市的产品有胶囊、片剂，均为贵州同济堂制药有限公司生产其工艺特点是将处方中药材经水提取、浓缩、干燥、制粒、压片包衣或装胶囊，由于中药成分复杂，且提出的中药成分中许多难溶于水，如补骨脂提取物等，导致制得的片剂或胶囊在体内崩解时间长，药物释放缓慢从而影响产品的疗效。早在1997年，中国专利申请就公开了将其六味中药净选，切截，然后煮提得到浓缩浸膏。但是遗憾的是该专利并没有提到是水提、醇提或者其他方式。随后，国内又出现了很多相关报道三药粉碎、三药水提中国专利申请. 3和. X公开了如下制法，续断、丹参、 补骨脂粉碎成细粉，其余淫羊藿等三味加水煎煮三次，每次lh，合并煎液，浓缩至相对密度为1. 35-1. 38 (300C )的稠膏，加入上述细粉，混勻，制成1000丸，干燥，打光，即得。丹参粉碎、其余水提中国专利申请. 7和. 0不同程度公开了仙灵骨葆的提取方法，包括以下步骤将丹参粉碎成细粉、过筛、备用；将淫羊藿、续断、知母、补骨脂粉碎成粗粉，将地黄切成片，加水煎煮三次，合并煎液，滤过，滤液浓缩至相对密度为1.20的清膏，加入丹参细粉，混勻，干燥，即得。丹参醇提、其余水提中国专利申请. 6公开了仙灵骨葆的提取方法，其中丹参粉碎， 以70-95%的乙醇做溶剂用多功能提取器提取两次，每次加入相当于药材重量6-8倍的 70-95%乙醇，第一次提取l_3h，第二次提取l_2h，合并乙醇提取液，过滤，50°C滤液浓缩至相对密度为1. 15-1.30的浸膏，再将丹参药材乙醇提取后的药渣与淫羊藿、续断、知母、补骨脂、地黄药材混合，以水做溶剂用多功能提取器提取三次，每次加入相当于药材重量6-14 倍的水，第一次提取2-4h，第二次提取l_3h，第三次提取0. 5-1. 5h,合并水提液，过滤，滤液浓缩至50°C相对密度为1. 15-1.30的浸膏，将醇提浸膏与水提浸膏混合，喷雾干燥、粉碎， 得到提取物。三药醇提、三药水提中国专利申请. X公开的实施例5提取方法是将续断、丹参、补骨脂粉碎成2-4目的粗粉，用6-12倍量的45-65的乙醇渗漉，收集渗漉液。回收乙醇至无醇味，得稠膏，渗漉药渣和淫羊藿等三味加水煎煮三次，每次Ih合并煎液，浓缩至相对密度为 1. 35-1. 38 (300C )的稠膏，与上述渗漉稠膏互相混勻，即得。上述方法有效成分不易提出，含量偏低，影响药品的疗效，且药液黏度较大，过滤困难。发明人为了解决以上问题，研发了一种新方法。
本发明的目的是提供一种仙灵骨葆复方的提取物。本发明的另一目的在于提供含仙灵骨葆复方的提取物的制剂。本发明的另一目的在于提供制备上述含仙灵骨葆复方的提取物的制剂的方法。本发明还提供仙灵骨葆复方的提取物及含提取物的制剂的应用。本发明提供的一种仙灵骨葆复方的提取物，仙灵骨葆提取物是由以下重量份的中药制成淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母 50-150份和地黄50-150份，其活性成分为丹参和补骨脂的醇提物，淫羊藿、续断、知母和地黄的水提物。仙灵骨葆提取物优选由以下重量份的成分制成淫羊藿1167份、续断167份、丹参 83份、知母83份、补骨脂83份、地黄83份。本发明所述的地黄为生地黄。本发明提供的一种仙灵骨葆复方的提取物，该提取物的制备方法包括以下步骤1)淫羊藿的水提物淫羊藿加水提，过柱大孔吸附树脂柱，用25-95%乙醇洗脱， 洗脱液浓缩干燥，即得；2)丹参和补骨脂的醇提物称取丹参、补骨脂药材，用乙醇回流提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，即得；3)续断、知母和地黄的水提物称取续断、知母、地黄药材，用水提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，即得；4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均勻，即得仙灵骨葆提取物。优选地，本发明提供的提取物，由以下方法制备1)淫羊藿的水提物淫羊藿加水煎煮提取1-3次，每次l_3h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至60-90°C时相对密度为0. 08-1. 08，趁热离心，倾出上清液，过大孔吸附树脂柱，上样液浓度为0. 2-0. 5g/ml ；上样量为lg_3g生药/ml树脂；吸附速度为4-12ml/min ； 洗脱速度为3-20ml/min ；水洗脱体积为1_5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去，再用2_6倍柱体积的浓度为25-90%乙醇洗脱；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得。2)丹参和补骨脂的醇提物称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，用60-90%的乙醇回流提取1-3次，每次l_3h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；3)续断、知母和地黄的水提物称取续断、知母、地黄药材，混合均勻，用水煎煮提取2-3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得；4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均勻，即得仙灵骨葆提取物。进一步优选，本发明的提取物由以下方法制备1)淫羊藿的水提物淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15 倍，第三次加水15倍，每次2h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80°C时相对密度为 1. 02，趁热离心，2500rpm, 20min,倾出上清液，上样液浓度为0. 5g/ml ；上样量为Ig生药/ml 树脂；吸附速度为Sml/min ；洗脱速度为16ml/min ；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液；再用70%乙醇洗脱淫洋藿黄酮类成分，用量为4倍柱体积；收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得干浸膏。倾出上清液，残渣，即可；2)丹参和补骨脂的醇提物称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，加入8倍量70%乙醇，回流提取2次，每次1.证，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60°C减压干燥，即得干浸膏；
3)续断、知母和地黄的水提物称取续断、知母、地黄药材，混合均勻，加入10倍量水，煎煮提取3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80°C减压干燥，即得
干浸膏；4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均勻，即得仙灵骨葆提取物。本发明还提供了上述提取物的制备方法，该方法包括以下步骤1)淫羊藿加水提过柱大孔吸附树脂柱，用20-95%洗脱，洗脱液浓缩干燥，得到淫羊藿的水提物；2)按配比称取丹参、补骨脂药材，乙醇回流提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，得丹参、补骨脂的醇提物；3)按配比称取续断、知母、地黄药材，用水提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥， 得续断、知母、地黄的水提物；4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均勻，即得仙灵骨葆提取物。本发明还提供了含上述提取物的制剂，该制剂由上述提取物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。所述制剂为固体制剂或液体制剂，所述固体制剂为片、胶囊、颗粒或丸剂；所述液体制剂为口服液或注射剂。所述药学上可接受的载体或稀释剂是指药学领域常规的药物载体，选自填充剂、 粘合剂、崩解剂、润滑剂、表面活性剂或矫味剂中的一种或几种，其中所述填充剂选自淀粉、蔗糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纤维素或葡萄糖寸。所述粘合剂选自纤维素衍生物、藻酸盐、明胶或聚乙烯吡咯烷酮等。所述崩解剂选自微晶纤维素、羧甲基淀粉钠、交联聚乙烯吡咯烷酮、低取代羟丙基纤维素或交联羧甲基纤维素钠。所述润滑剂选自硬脂酸、聚乙二醇、碳酸钙、碳酸氢钠、微粉硅胶、滑石粉或硬脂酸镁。所述表面活性剂选自十二烷基苯磺酸钠、硬脂酸、聚氧乙烯-聚氧丙烯共聚物、脂肪酸山梨坦或聚山梨酯(吐温)等。所述矫味剂选自阿斯巴甜、蔗糖素或糖精钠。本发明还提供制备上述含仙灵骨葆复方的提取物的制剂的方法，将仙灵骨葆复方的提取物与药学上可接受的载体或稀释剂混勻，采用常规制剂方法制成各种剂型。本发明还提供了上述仙灵骨葆复方提取物及含提取物的制剂在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。本发明提供的仙灵骨葆复方的提取物具有以下优点1、与现有技术中相比1)现有技术中的丹参醇提，其余水提的缺点为有效成分不易提出，经测定含量偏低，从而影响药品的疗效。且药液黏度较大，过滤困难。2)现有技术中的丹参、补骨脂、续断醇提，淫羊藿、知母、地黄水提的缺点为
①经测定含量偏低；②该方法得膏率较高，从而导致临床服用量较大，患者的顺应性差。3)本发明中淫羊藿单独使用水提过柱的方法，丹参、补骨脂醇提，续断、知母、地黄水提的方法①淫羊藿单独水提过柱方中淫羊藿量较大，通过水提过柱可以对其有效成分进行富集，从而提高朝藿定C与淫羊藿苷含量，经测定朝藿定C的含量最高可达到4. 7mg/g，淫羊藿苷含量最高可达到2. 2mg/g ；②丹参、补骨脂用醇提丹参主要含有以丹参酮II A为代表的脂溶性二萜醌类成分及以丹酚酸B为代表的水溶性酚酸类成分；补骨脂主要含有香豆素类成分，因此选择乙醇提取，有利于有效成份的提取，进一步提高药效。③续断、知母、地黄水提药物成分损失少；药液容易浓缩、易喷雾干燥；干膏收率升高。2、本发明提取物中朝藿定C与淫羊藿苷含量显著提高，经测定朝藿定C的含量最高可达到4. 7mg/g，淫羊藿苷含量最高可达到2. 2mg/go3、本发明提供的仙灵骨葆提取物较现有技术治疗骨质疏松症的效果显著。
具体实施例方式以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。所述倍量为重量倍数，如淫羊藿加水20倍，为加入淫羊藿重量20倍量的水。实施例1 仙灵骨葆胶囊1、复方组成淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。2、制备方法1)淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水15 倍，每次池，提取液滤过，合并滤液，减压浓缩至80°C时相对密度为1. 02，趁热离心，转速为 2500rpm,离心20min，倾出上清液，过大孔吸附树脂HP-20型，上样液浓度为0. 5g/ml ；上样量为Ig生药/ml树脂；吸附速度为Sml/min ；洗脱速度为16ml/min ；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液(检查有无淫羊藿苷、朝藿定C、总黄酮泄露，如果有，则重新过柱)；再用4倍柱体积的70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏， 减压干燥，即得淫羊藿的水提取，收率为19.8% ；2)称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，用乙醇回流提取2次，每次加入8倍量70% 乙醇，每次1.证，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60°C减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为18. 5% ；3)称取续断、知母、地黄药材，混合均勻，煎煮3次，每次加入10倍量水，每次煎煮 2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80°C减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为19.0% ；4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均勻，得到总提取物，然后加入总提取物1倍量的微晶纤维素，混合成均勻的粉末，装入胶
3、规格0.458/粒。4、提取物的含量的测定及结果(朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15))1)含量测定方法照高效液相色谱法(中国药典2010年版一部附录VI D)测定。①色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；乙腈-水 (25
75)为流动相；检测波长为270nm。理论板数按朝藿定C峰计算应不得低于6000。②对照品溶液的制备精密称取经五氧化二磷减压干燥器中干燥36小时的朝藿定C及淫羊藿苷对照品适量，加甲醇制成每Iml分别含朝藿定C及淫羊藿苷0. 3mg,0. Img 的混合溶液，作为对照品溶液，即得。③供试品溶液的制备取干燥的提取物，研细，取0.5g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇50ml，称定重量，超声处理(功率250W，频率25kHz) 60分钟，取出，放冷，再称定重量，用乙醇补足减失的重量，摇勻，取上清液，滤过，取续滤液，即得。④测定法分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10μ 1，注入液相色谱仪，测定， 即得。2)结果本实施例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15) 计，分别为 4. 7mg/g，2. 2mg/go实施例2 仙灵骨葆颗粒1、组成淫羊藿600g、续断80g、丹参50g、知母50g、补骨脂50g、地黄50g。2、制备方法1)淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加30倍的水，第二次加20倍的水，第三次加20倍的水，每次煎煮池，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至90°C时相对密度为1. 08， 趁热离心，转速为2500rpm，时间为20min，倾出上清液，其余物质过大孔吸附树脂柱HP-20 型上样液浓度为0. 5g/ml ；上样量为Ig生药/ml树脂；吸附速度为Sml/min ；洗脱速度为 16ml/min ；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液(检查有无淫羊藿苷、 朝藿定C、总黄酮泄露)；再用4倍柱体积的85%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提物，收率为19.2% ；2)称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，用乙醇回流提取3次，每次加入6倍量85% 乙醇，每次提取池，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60°C减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为19.0% ；3)称取续断、知母、地黄药材，混合均勻，用水煎煮3次，每次加入12倍量水，每次煎煮2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80°C减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为18.2% ；4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均勻，得到总提取物，然后加入总提取物1倍量的糊精和1倍的乳糖，混勻、制粒、干燥、整粒，分装，即得颗粒剂。3、规格48/袋。4、提取物的含量的测定及结果含量测定方法见实施例1 ；结果本实施例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计， 分别为 4. 2mg/g, 1. 7mg/go
实施例3:仙灵骨葆片1、复方组成淫羊藿1500g、续断200g、丹参150g、知母150g、补骨脂150g、地黄 150g。2、制备方法1)淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水 15倍，每次煎煮池，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80°C时相对密度为1.02，趁热离心，转速为2500rpm，时间为20min，倾出上清液，过HP-20型大孔吸附树脂柱，上样液浓度为 0. 5g/ml ；上样量为Ig生药/ml树脂；吸附速度为Sml/min ；洗脱速度为16ml/min ；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液(检查有无淫羊藿苷、朝藿定C、总黄酮泄露)；再用4倍柱体积的70%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提物，收率为19.6% ；2)称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，用乙醇回流提取2次，每次加入8倍量70% 乙醇，每次提取1.证，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60°C减压干燥， 即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为18.8% ；3)称取续断、知母、地黄药材，混合均勻，用水煎煮3次，每次加入10倍量水，每次煎煮2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80°C减压干燥，即得续断、知母、地黄的水提物，收率为18.6% ；4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均勻，制成颗粒，干燥，压片，即可片剂。3、规格0. 25g/片。4、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为本实施例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，分别为 4. 4mg/g,2. Omg/go实施例4 仙灵骨葆软胶囊1、组成淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。2、制备方法1)淫羊藿加水煎煮提取2次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，每次煎煮池， 提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80°C时相对密度为1.02，趁热离心，转速为2500rpm， 时间为20min，倾出上清液，上大孔树脂吸附HP-20型，上样液浓度为0. 5g/ml，上样量为Ig 生药/ml树脂，吸附速度为Sml/min ；洗脱速度为16ml/min，水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液；再用4倍柱体积浓度为50%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得淫羊藿的水提物，收率为20.0% ；2)称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，回流提取2次，每次加入5倍量65%乙醇，每次提取时间为池，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，60°C减压干燥，即得丹参、补骨脂的醇提物，收率为19. 3% ；3)称取续断、知母、地黄药材，混合均勻，用水煎煮3次，每次加入12倍量水，每次煎煮时间为2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，80°C减压干燥，即得续断、知母、 地黄的水提物，收率为19.0% ；4)合并淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，续断、知母、地黄的水提物，混合均勻，得到总提取物，然后加入总提取物1倍量的植物油混勻，制得软胶囊。3、规格0. 45g/粒。4、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为本实施例的提取物中含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，分别为 4. 0mg/g、l. 5mg/g。对比例1 以. 6的实施例1的方法(丹参醇提，其余水提)1、组成淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。2、制备方法1)丹参粉碎，以95%的乙醇做溶剂用多功能提取器提取两次，每次加入相当于药材重量6倍的95%乙醇，每次提取1小时，合并乙醇提取液，过滤，滤液浓缩至相对密度为 1. 20 (500C )的浸膏，得丹参的醇提物；2)将丹参药材乙醇提取后的药渣与淫羊藿、续断、知母、补骨脂、地黄药材混合，以水做溶剂用多功能提取器提取三次，每次加入相当于药材重量6倍的水，第一次提取池，第二次提取lh，第三次提取0. 5h,合并水提液，过滤，滤液浓缩至50°C相对密度为1. 15 (50°C ) 的浸膏，得水提物，收率为14.5% ；3)将丹参的醇提物与水提物混合，喷雾干燥、粉碎，得到提取物200g。4)将提取物与提取物1倍的微晶纤维素混勻，分装成胶囊。3、规格为0. 45g/粒。4、提取物含量的测定，方法同实施例1，结果为本对比例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，分别为 2. 6mg/g、0. 9mg/g0对比例2 :. 0的实施例1的方法(丹参粉碎、其余水提)1、组成淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。2、提取方法将丹参粉碎成细粉，过200目筛备用；淫羊藿、续断、知母、补骨脂四味药材粉碎成粗粉，地黄切成薄片，与上述粗粉混勻，加8倍量的水(第一次补足药材150%的吸水量)，煎煮3次，煎煮时间分别为3、2、lh， 合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至1. 15-1. 25(50°C )的稠膏状，加入丹参粉，混勻，60°C以下低温真空干燥，得提取物，收率为14.8%。3、制剂将上述提取物中加入适量的微晶纤维素，混勻，分装成胶囊。4、规格胶囊规格为0. 45g/粒。5、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为本对比例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，分别为 2. 7mg/g、0. 7mg/g。对比例3 参考. X的实施例1 (三药粉碎、三药水提)1、组成淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。2、提取方法1)将续断、丹参、补骨脂粉碎成细粉，过80目筛；2)其余淫羊藿等三味，用水煎煮3次，每次加10倍量的水，每次煎煮lh，合并煎液，浓缩至相对密度为1.35(30°C )的稠膏，收率为14.0% ；3)将细粉与稠膏混勻，干燥，即得提取物；3、制剂将上述提取物粉碎，过100目，加入1倍量的微晶纤维素，混勻，分装成胶
^ ο4、规格胶囊规格为0. 45g/粒。5、提取物的含量的测定方法同实施例1，结果为本对比例的提取物含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，分别为 2. 4mg/g、0. 9mg/g0对比例4 参考. X的实施例5 (三药醇提、三药水提)1、组成淫羊藿1167g、续断167g、丹参83g、知母83g、补骨脂83g、地黄83g。2、提取方法1)将续断、丹参、补骨脂用12倍量的95%的乙醇回流提取2. 5小时，回收乙醇至无醇味，减压浓缩得醇提干浸膏，收率为15.0% ；2)将续断、丹参、补骨脂的药渣和淫羊藿、地黄、知母等三味加水煎煮三次，每次加12倍量的水，每次煎煮lh，合并煎液，浓缩至相对密度为1. 30 (25 0C )的稠膏，收率为 14. 3% ；3)将醇提干浸膏与水提稠膏，干燥，粉碎成160目的细粉，即得提取物。3、将上述提取物中加入等重量的微晶纤维素，混勻，分装成胶囊。4、胶囊规格为0.45g/粒。5、提取物的含量的测定，方法同实施例1，结果为本对比例的提取物中含淫羊藿以朝藿定C(C39H5tlO19)及淫羊藿苷(C33H4tlO15)计，分别为 2. 2mg/g、0. 7mg/g。实验例1 含量的检测对实施例1-4的提取物及对比例1-4的提取物的含量进行检测，检测方法同实施例1，结果见表1 表1:
1.一种仙灵骨葆提取物，其特征在于，仙灵骨葆提取物是由以下重量份的中药制成 淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母50-150份和地黄50-150份，其活性成分为丹参和补骨脂的醇提物，淫羊藿、续断、知母和地黄的水提物。
2.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述淫羊藿水提物由以下方法制备淫羊藿用水提取，然后过柱大孔吸附树脂柱，用20-95%乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥，即得。
3.根据权利要求2所述的提取物，其特征在于，所述淫羊藿水提物由以下方法制备淫羊藿加水煎煮提取1-3次，每次l_3h，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至60-90°C时相对密度为0. 08-1. 08，趁热离心，倾出上清液，过大孔吸附树脂柱，上样液浓度为0. 2-0. 5g/ ml ；上样量为lg-3g生药/ml树脂；吸附速度为4-12ml/min ；洗脱速度为3-20ml/min ；水洗脱体积为1-5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液，然后用2-6倍柱体积的浓度为 25-90%乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得。
4.根据权利要求2所述的提取物，其特征在于，所述淫羊藿水提物由以下方法制备淫羊藿加水煎煮提取3次，第一次加水20倍，第二次加水15倍，第三次加水15倍，每次池，提取液滤过，合并滤液，浓缩成相当至80°C时相对密度为1. 02，趁热离心，转速为 2500rpm，时间为20min，倾出上清液，上样液浓度为0. 5g/ml ；上样量为Ig生药/ml树脂；吸附速度为Sml/min ；洗脱速度为16ml/min ；水洗脱体积为5倍柱体积，洗脱液呈淡黄色，弃去水洗脱液，然后用4倍柱体积的浓度为70%的乙醇洗脱，收集洗脱液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏，减压干燥，即得。
5.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述丹参和补骨脂醇提物由以下方法制备称取丹参、补骨脂，用乙醇回流提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，即得。
6.根据权利要求5所述的提取物，其特征在于，所述丹参和补骨脂醇提物由以下方法制备称取丹参、补骨脂药材，混合均勻，用60-90%的乙醇回流提取1-3次，每次l-3h，提取液滤过，合并滤液，减压回收乙醇，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得。
7.根据权利要求1所述的提取物，其特征在于，所述续断、知母、地黄水提物由以下方法制备称取续断、知母、地黄药材，用水煎煮提取2-3次，每次2小时，提取液滤过，合并滤液，浓缩成稠膏状，减压干燥，即得。
8.含权利要求1-7任一项所述提取物的制剂，其特征在于，该制剂由所述提取物和药学上可接受的载体或稀释剂组成。
9.权利要求1-7任一项所述的仙灵骨葆提取物及权利要求8所述的含提取物的制剂在制备治疗骨质疏松症的药物中的应用。
10.一种制备权利要求1-7任一项所述的提取物的方法，其特征在于，该方法包括以下步骤1)淫羊藿加水提过柱大孔吸附树脂柱，用20-95%乙醇洗脱，洗脱液浓缩干燥，得到淫羊藿的水提物；2)按配比称取丹参、补骨脂药材，乙醇回流提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，得丹参、补骨脂的醇提物；3)按配比称取续断、知母、地黄药材，用水提取，提取液滤过，浓缩成稠膏状，干燥，得续断、知母、地黄的水提物；4)取淫羊藿的水提物，丹参、补骨脂的醇提物，知母、续断和地黄的水提物，混合均勻，即得仙灵骨葆提取物。
本发明涉及一种仙灵骨葆提取物，含其制剂及其制备方法，该提取物是由以下重量份的中药制成淫羊藿600-1500份、丹参50-150份、补骨脂50-150份、续断80-200份、知母50-150份和地黄50-150份，其活性成分为丹参和补骨脂的醇提物，淫羊藿、续断、知母和地黄的水提物。本发明提供的仙灵骨葆提取物具有很好的治疗骨质疏松症，效果优于现有技术提供的提取物。
文档编号A61K36/027SQ
公开日日 申请日期日 优先权日日
发明者冯泽熹, 周宁, 孙宜春, 曾香兰, 李冬雪, 杜守颖, 王晓春, 陈雯 申请人:贵州同济堂制药有限公司