怎样唱歌不跑调不跑就生集

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2011-05-21 10:56 标签： 怎样唱歌不跑调
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目的条带跑不开，是怎么了？？？
我在做植物的内生真菌，我先简单说下，我提了植物总的DNA，用真菌通用引物ITS1F-ITS4跑的pcr，目的是扩增总DNA里边的真菌序列，一般目的条带是在500-750bp之间，根据文献，这个通用引物会同时扩增出植物的序列，但是扩增出来的植物序列都会比真菌的长。
目前我遇到的问题是：我能扩增出多条带，但是条带跑不开，或者说跑的不是很开，不知道怎么办？因为我还要切胶回收，做蓝白斑筛选，这样难度就很大。我用了5ulpcr产物跑的胶，会不会是产物点样太多，还是我的pcr循环了35次，太多了吗？我只想让这些条带分的清晰点，不要太多融合，另外我每次跑的条带都不直，我做胶已经很按要求了，是不是我点样的技术问题，还是电泳液要换新的？这三张图是我在调试不同退火温度的
会不会是我点的样太多了
你已经发现问题了，同理没跑开为什么没想到你的样品DNA也太多了？克隆为目的的根本不需要这么多。如果主带明显多于其他条带，全部直接克隆，挑出你想要的大小也相当容易。
嗯，明天我再试下，之所以要点样多是因为我做植物内生真菌的多样性，最后要用50ul体系跑，然后切胶回收，如果点样少会不会对多样性结果有影响？
多样性和最终亮度并无直接关系，很亮可以只有一种分子，看不见的一条DNA里面可能每条DNA都不相同。没逻辑。相反，是通过PCR扩增得到的库，保留多样性的第一原则就是尽量少循环，以减少扩增偏差和同质化！
嗯，正在pcr，马上试
你要分离500-750bp的片段，胶浓度1%偏低了，可以将胶浓度提高到2%看看。看你的Marker就没有跑开。
再就是用大一点的梳子做胶，这样跑出来的条带不会弯得这么严重。你的目的产物浓度挺高的，几条带的亮度差别较大，而大小差别又很小，所以是不大好跑开。只能提高胶的浓度，多跑一会儿
嗯嗯，吸取了各位意见，今天从新做了一次，比以前好很多了，今晚上图，觉得有待改进
我的DNA原样稀释了10，我也试过稀释15倍，但是15倍竟然啥都没有跑出来，估计是我操作失误了，明天选两个样再稀释下试试
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随时随地聊科研每天跑步下蹲宝宝会不会好生？_我今天试了一下，居然还能跑起来_宝宝树
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每天跑步下蹲宝宝会不会好生？
我今天试了一下，居然还能跑起来，突发奇想：每天跑步下蹲是否有利于呢？我家宝宝已经入盆一周多了，头也比较低。
额，跑步不好吧
下蹲只能浅蹲
宝妈真厉害。。我走得快点都觉得疼。。
跑步？你就不怕一个不注意给甩出来？多危险啊。
跑步太危险了吧，，下蹲也不是很好的运动，，，个人觉得散步比较好
我今天早上深蹲了50个，没特别感觉，就腿酸了一点
跑步小心胎盘早剥
我也能跑～
看见有个宝妈想早点儿生就蹲起蹲起一百个 然后见红了 然后生了～
回复 &安逸朵&
19:32:57发表的
我今天早上深蹲了50个，没特别感觉，就腿酸了一点
天那。还跑？走路都是问题1
我上班是在九楼，然后孕晚期就是每天上下班爬楼梯，宝宝提前半个月生了，顺产，过程很顺利
是男宝还是女宝？我家女宝宝，总觉得会推迟呢，可是宝宝已经七斤左右了，我怕我生不出来啊
回复 &juexiao&
20:02:42发表的
我上班是在九楼，然后孕晚期就是每天上下班爬楼梯，宝宝提前半个月生了，顺产，过程很顺利
亲，你有反应了吗？
回复 &水毛毛&
18:59:36发表的
额，跑步不好吧
我等预产期到了再折腾吧，我妈说剧烈运动容易脐带早剥，就只能剖了。所以现在还是老实点比较稳妥。而且我问过来人，也不一定要运动，因人而异。
回复 &乔伊麻麻感恩中&
19:02:52发表的
下蹲只能浅蹲
你哪里疼啊亲？我坐一会站起来的时候耻骨特疼，自己按摩一会儿再走走就好了。我家宝宝又在我肚子里练打嗝了，也许真的是肚里一天顶出来十天吧，宝妈咱们再坚持坚持
回复 &詹宝妈咪&
19:05:33发表的
宝妈真厉害。。我走得快点都觉得疼。。
每天散步两小时，没反应啊。真是不到生完不知道怎么个情况
回复 &小豆包小土豆&
19:08:56发表的
跑步太危险了吧，，下蹲也不是很好的运动，，，个人觉得散步比较好
宝妈刚足月，别着急啊！
回复 &安逸朵&
19:32:57发表的
我今天早上深蹲了50个，没特别感觉，就腿酸了一点
我家b超也是女宝，不过咱们是不是有点过分利索了？
回复 &喂你屁股太大挡我信号了&
19:56:44发表的
我也能跑～
我妈说怕脐带早剥，不让我瞎折腾
回复 &喂你屁股太大挡我信号了&
19:57:43发表的
看见有个宝妈想早点儿生就蹲起蹲起一百个 然后见红了 然后生了～
散步是不可少的哦，坚持就是胜利
回复 &玲玲贝贝521&
20:02:30发表的
天那。还跑？走路都是问题1
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